Биореактивы

(5,6)-FAM диацетат NHS-активированный эфир — это производное флуоресцеина (FAM), используемое для мечения биомолекул, содержащих первичные аминогруппы. Особенностью данного соединения является то, что оно не флуоресцирует до тех пор, пока не произойдет отщепления ацетатных групп. Под воздействием внутриклеточных эстераз, а также в щелочной среде, происходит образование яркого флуорофора c максимумами поглощения и испускания в зеленой области (при ~492 нм и ~517 нм, соответственно). Благодаря этому свойству данный продукт применяется для трекинга клеток в проточной цитометрии, а также может быть использован для изучения активности внутриклеточных эстераз.

Водорастворимый краситель sulfo-Cyanine5, свободная карбоновая кислота. Подходит для использования в качестве референсного красителя в канале Cy5®, в качестве отрицательного контроля. Может также быть применена в этерификации по Штеглиху (ацилировании спиртов при активации карбодиимидами с катализом DMAP). Для ацилирования аминогрупп рекомендуем пользоваться активированным эфиром sulfo-Cyanine5. Мы производим также несульфированную версию этого реагента - Cyanine5 карбоновую кислоту.

Многие природные и синтетические молекулы содержат карбонильный фрагмент в виде альдегидной группы или кетогруппы. Карбонильные группы реагируют с гидразидами с образованием гидразонов. Реакция легко протекает при pH около нейтрального. Образующиеся гидразоны очень стабильны. Соединения, содержащие 1,2-диольный фрагмент (например, сахара) могут быть окислены периодатом натрия до карбонильных соединений для дальнейшей модификации гидразидами. Этот метод эффективен для мечения гликопротеинов (таких как антитела) и полисахаридов. FAM гидразид - гидразидное производное флуоресцеина, яркого красителя для канала 488 нм, предназначенное для мечения карбонильных соединений.

DusQ 1 dT фосфорамидит — это реагент для синтеза модифицированных олигонуклеотидов, содержащих нефлуоресцирующий тушитель, обычно применяется для мечения по внутреннему положению ДНК зонда. DusQ 1 эффективно гасит флуоресценцию с резонансным переносом энергии (FRET), в статическом варианте — с тушением флуоресценции флуорофора через образование комплекса в основном состоянии, и обычно служит для приготовления зондов для количественной ПЦР с репортером и тушителем. Данный фосфорамидит имеет DMT-защиту гидроксиметильной группы, и может использоваться для очистки на картридже. DusQ 1 может сочетаться с флуорофорами, испускающими в зелёной и жёлтой областях спектра с целью формирования комплексов с высокой эффективностью тушения. Для DusQ 1 характерен широкий спектр поглощения с максимумом в диапазоне 480–580 нм в сочетании с распространенными репортерами, такими как FAM, TET, JOE, HEX, Cyanine3.

Активированный N-гидроксисукцинимидный (NHS) эфир красителя HEX (гексахлорфлуоресцеина), чистый 6-изомер. Активированные эфиры обладают реакционной способностью в отношении первичных и вторичных аминогрупп. С их помощью можно метить аминогруппы в белках, пептидах, амино-модифицированных олигонуклеотидах и других целевых молекулах. HEX — производное флуоресцеина, содержащее в своей структуре 6 атомов хлора в качестве заместителей. HEX является аналогом таких красителей, как JOE, BODIPY™ 530/550, VIC™ по спектральным характеристикам с поглощением при 533 нм и эмиссией при 549 нм в желто-зеленой области спектра. HEX NHS-эфир часто используется в секвенировании нуклеиновых кислот, ПЦР/кПЦР и других схожих исследованиях.

sulfo-Cyanine5.5 (аналог Cy5.5® и Sulfo-Cy5.5®) - водорастворимый флуорофор, излучающий в дальней красной области спектра. Имеет в составе четыре сульфогруппы и благодаря этому при нейтральных pH заряжен отрицательно. Очень гидрофилен. sulfo-Cyanine5.5 демонстрирует очень низкую зависимость флуоресценции от pH, отличается высоким коэффициентом экстинкции. Данный продукт представляет собой карбоксил-производное красителя и может использоваться для калибровки приборов и как нереакционноспособный флуорофор для контроля.

PreciseGreen — ДНК-связывающий краситель на основе бензотиазола. 200-кратный раствор в ДМСО. Это флуоресцентный сенсор, специфичный в отношении двухцепочечной ДНК. Его эмиссию в канале флуоресцеина можно легко детектировать и измерять с помощью кюветного флуориметра, флуориметра для микропланшетов, и с помощью специальных устройств для измерения количества ДНК. PreciseGreen примечателен тем, что флуоресцентный сигнал прямо пропорционален концентрации ДНК в диапазоне от десятков пикограмм до сотен нанограмм в миллилитре образца. Также доступен готовый набор с данным красителем.

Алкин-ПЭГ3-OH (моно-пропаргил-триэтиленгликоль) - бифункциональный линкер, содержащий гидроксигруппу и терминальную тройную связь. Этот линкер можно использовать для модификации различных молекул и введения в их состав алкинильного фрагмента, и последующей конъюгации с помощью Click chemistry.

Азид-ПЭГ2-амин — бифункциональный кросслинкер с терминальными азидо- и аминогруппой. Аминогруппа реагента может быть конъюгирована с карбоксильной группой в составе пептидов, белков или антител после активации последней карбидиимидом (EDC). В свою очередь, терминальная азидная группа легко взаимодействует с различными алкинами в клик-реакциях. Диэтиленгликоль (ПЭГ2) представляет собой короткий гидрофильный линкер с минимальным пространственным разделением биомолекул в составе получаемого конъюгата.

Иммуноглобулины IgY курицы, очищенный белок.

sulfo-Cyanine5 dUTP - модифицированный трифосфат для ферментативного мечения ДНК, аналог Cy5-dUTP. В отличие от трифосфатов, содержащих краситель, напрямую связанный с аминоаллил-dUTP, этот трифосфат содержит линкер, повышающий эффективность его встраивания обычными полимеразами типа Taq-полимеразы. sulfo-Cyanine5 - яркий краситель для дальней красной области (канал Cy5). Трифосфат поставляется в виде лиофилизированной литиевой соли.

Каталитический буфер предназначен для конъюгации белков, модифицированных азидом (или алкином), с алкином (или азидом) красителя с помощью медь-катализируемой реакции 1,3-диполярного циклоприсоединения (CuAAC). THPTA лиганд в составе буфера ускоряет реакцию и стабилизирует каталитически активные соединения меди (I). Кроме того, присутствие водорастворимого THPTA лиганда позволяет проводить реакцию мечения белков в водной среде и, за счёт стабилизации степени окисления (I) меди, минимизирует генерацию активных форм кислорода (АФК) и нежелательное повреждение ими белков. Входящий в состав буфера аминогуанидин препятствуют связыванию реакционноспособных альдегидов - продуктов гидролиза дегидроаскорбата, с боковыми цепями аргинина, N-концевого цистеина и лизина. Готовый 1.5х буфер содержит все необходимые компоненты для проведения реакции, кроме восстановителя меди (II) до меди (I). В качестве восстановителя мы рекомендуем использовать аскорбиновую кислоту. Состав буфера: медь (II), ацетат триэтиламмония pH 6.8, THPTA лиганд, аминогуанидин.