Биореактивы

Стерильный сухой порошок трипсина из поджелудочной железы свиньи (1:250). Готов для использования при культивировании клеток после растворения в 100 мл стерильного раствора DPBS без кальция и магния (Арт.1.2.3.4. каталога БиолоТ). Срок годности - 4 года. Условия хранения и транспортировки - при +4 °С в темноте. Допускается транспортировка в течение двух недель при комнатной температуре.

Готовая смесь для ПЦР «5X qPCRmix-HS» предназначена для рутинных аналитических исследований. «5X qPCRmix-HS» представляет собой смесь рекомбинантной Taq ДНКполимеразы (получена из штамма E.coli, экспрессирующего ген polA термостабильной бактерии Thermus aquaticus YT1), специфических моноклональных антител к полимеразе, dNTP (0.75 мМ каждого), Mg2+ (15 мМ) и буфера для ПЦР. Для проведения ПЦР в реакцию требуется добавить только праймеры, воду, ДНК и компоненты для детекции ДНК — флуоресцентные зонды типа TaqMan или интеркалирующий краситель (Sybr Green, Eva Green). Область применения • Амплификация ДНК. • ПЦР-РВ с TaqMan-зондами. • ПЦР-РВ с интеркалирующими красителями. • ПЦР-скрининг. • Мультиплексная ПЦР.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: RCATGY RCATG↑Y YGTACR Y↓GTACR Источник: Bacillus stearothermophilus NS Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер B Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 50 10 10 75 50 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 250 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C. Лигирование: После гидролиза 10-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°C. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B, BSA. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE. Примечание: Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.

Описание: Мы предлагаем 10хSE-буферы, оптимизированные для работы с нашими ферментами. 10хSE-буферы обеспечивают оптимальные реакционные условия для достижения 100% активности, производимых нами ферментов (эндонуклеаз рестриции). Каждый фермент поставляется в комплекте с рекомендованным 10хSE-буфером. Некоторые ферменты требуют специфические реакционные условия, поэтому для них созданы индивидуальные кратные SE-буферы. Также некоторым эндонуклеазам рестриции для достижения 100% активности дополнительно требуется бычий сывороточный альбумин (BSA) или S-аденозил-L-метионин (SAM). Когда это необходимо, данные реактивы поставляются в комплекте с ферментом и 10хSE-буфером. Состав: 1X(50 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°C); 10 mM MgCl2; 5 mM DTT.) Условия хранения: Хранить при -20°C С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер.

BDP FL — фотостабильный дипиррометеновый краситель для канала FAM (флуоресцеина). Этот флуорофор совместим с фильтрами для флуоресцеина. Это производное — циклоалкин (азодибензоциклооктин) для безмедной клик-реакции с азидами.

Антитела козы к иммуноглобулину IgM человека идеально подходят для использования в методах иммуноферментного анализа. В ИФА имеют следующую специфичность: IgM человека 100% IgA человека <5% IgG человека <5% IgM представляют собой пентамер основной четырехцепочной единицы, ситезируемый плазматическими клетками и составляет 5 - 10% от общего количества иммуноглобулинов в сыворотке крови. Антитела IgM появляются при первичном иммунном ответе B-лимфоцитами на ранее неизвестный антиген. К биологической функции IgM можно отнести агглютинацию бактерий, нейтрализацию вирусов, активации комплемента. В дополнение IgM играют важную роль в выводе возбудителя из кровеносного русла. Повышенное содержание IgM в крови наблюдается при ряде инфекций, как у взрослых, так и у новорожденных.

Алкиновое производное биотина для конъюгации посредством клик-реакции. Это алкиновое производное реагирует с различными азидами при катализе соединениями Cu(I). Биотинилированные конъюгаты могут использоваться в различных методах, включающих аффинное связывание со стрептавидином.

Биотин-ПЭГ4-амин — бифункциональная молекула на основе тетраэтиленгликоля (ПЭГ4), содержащая биотин и первичную аминогруппу. Реагент позволяет метить различные биомолекулы (такие как ДНК, олигонуклеотиды и белки) биотином за счет реакции аминогруппы с NHS -эфирами или карбоновыми кислотами в присутствии EDC или HATU. Биотин-меченые соединения могут быть затем связаны с авидином или стрептавидином для дальнейшей их очистки или детекции. Длинный ПЭГ4-линкер отделяет остаток биотина от молекулы-мишени, обеспечивая эффективное его связывание с авидином или стрептавидином. Линкер также повышает растворимость соединения в воде, облегчая тем самым биоконъюгацию.

Молекула, содержащая карбоксильную группу (COOH) и алкилиодидную функциональность. Алкилиодиды являются мощнейшими алкилирующими агентами. Они реагируют с различными нуклеофилами — тиолами, аминами, алкоголятами и фенолятами. Эта молекула позволяет осуществлять конъюгации через гибкий линкер ПЭГ3 (триэтиленгликоль).

Стрептавидин представляет собой тетрамерный биотин-связывающий белок, выделенный из бактерии Streptomyces avidinii. Стрептавидин способен с высокой аффинностью и селективностью связывать до четырех молекул биотина посредством множественных водородных связей и ван-дер-ваальсовых взаимодействий. Из-за отсутствия углеводных модификаций и близкого к нейтральному pI, стрептавидин демонстрирует меньшее неспецифическое связывание, в сравнении с другим биотин-связывающим белком — авидином. Стрептавидин обладает высокой термостабильностью и устойчивостью к экстремальным значениям pH, денатурирующим агентам и ферментативной деградации, что позволяет использовать его в широком спектре экспериментальных условий. Флуоресцентные конъюгаты стрептавидина обычно используют в качестве реагента второй ступени для специфического обнаружения различных биотин-меченых биомолекул, таких как белки (антитела и др.), нуклеиновые кислоты, липиды в протоколах непрямого иммунофлуоресцентного окрашивания, вестерн-блоттинге, проточной цитометрии, микропланшетном анализе и других методах детекции. Данный стрептавидин представлен в форме лиофилизированного конъюгата с AF 594 — ярким, фотостабильным красным флуорофором, спектральные характеристики которого сходны с Texas Red (максимум поглощения — 586 нм, максимум эмиссии — 613 нм). Рекомендуемый диапазон концентраций для использования составляет 0,5-10 мкг/мл. Избегайте использования растворов, содержащих биотин (некоторые сыворотки, RPMI 1640 и т. д.) в качестве разбавителей.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: GCGATCGC GCGAT↑CGC CGCTAGCG CGC↓TAGCG Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген AsiSI из Arthrobacter species S Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК Аденовируса-2 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК Аденовируса-2 Оптимальный буфер: SE-буфер B Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 75 10 25 25 Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: Не блокируется dam-метилированием при перекрывании (GmATC): GCGATCGC Блокируется CG метилированием. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B. Примечание: Фермент обладает звездчатой активностью.

Талидомид-содержащий билдинг-блок с карбоксильной группой для удобной сборки молекул PROTAC через присоединение аминных фрагментов лигандов посредством линкера на 4-кислород положение тадидомида. Комбинированные молекулы выборочного протеолиза белка (PROteolysis TArgeting Chimeras, PROTACs) — это гетеробифункциональные молекулы, способные проникать через клеточную мембрану, и позволяющие удалять выбранный целевой белок из клетки. Один конец молекулы PROTAC содержит лиганд, способный связываться с белком интереса, а второй — с субтрат-распознающим белком белкового комплекса E3-лигазы. Сближение белка и E3-лигазы вызывает полиубиквитинирование субстрата с последующей его деградацией клеточной протеасомой, которая распознает убиквитиновую метку. Существует несколько Е3-лигазных комплексов, которые на практике подходят для PROTAC. Талидомид — лиганд, который позволяет мобилизовать цереблон E3-лигазу (CRBN). Его используют многие новые исследовательские препараты работающие по механизму PROTAC, находящиеся на последних стадиях клинических испытаний.