Биореактивы

Готовые к работе лентивирусные частицы LVT-TurboFP635, несущие ген флуоресцентного белка TurboFP635, предназначены для трансдукции клеток. Лентивирусный вектор эффективно встраивается в геном клеток-мишеней, вызывая стабильную экспрессию флуоресцентного белка TurboFP635 через 48-72 часа после добавления к клеточной культуре.

BDP TR - бордипиррометеновый краситель, спектры поглощения и эмиссии которого соответствуют ROX. По сравнению с ROX, квантовый выход его флуоресценции существенно выше. Малеимид можно конъюгировать с тиольными группами белков и пептидов.

Биотин-X-малеимид представляет собой тиол-реакционноспособный бифункциональный линкер для мечения SH-групп. Его можно использовать для присоединения биотина к белкам и пептидам через остатки цистеина, а также к другим тиолированным молекулам, таким как тиол-содержащие олигонуклеотиды. Соединения, меченные биотином, затем можно связывать с авидином или стрептавидином для дальнейшей их очистки или обнаружения. Группа биотина сравнительно небольшая и не влияет на биологическую активность биотинилированных молекул. Реагент содержит аминокапроновый спейсер, который устраняет стерические препятствия для связывания целевой молекулы со стрептавидином и авидином.

Цитруллин-d2, одно из меченных стабильными изотопами производных цитруллина, в котором два атома водорода заменены дейтерием (3,3-d2). Используется в качестве внутренних стандартов, меченных стабильным изотопом, для количественных исследований в метаболомике, протеомике, в ЯМР-спектроскопии, масс-спектрометрии (MS). В молекулу включены два не обмениваемые атома дейтерия (3,3-d2) при ионизации и в растворе.

Аннексин V (или Аннексин A5) принадлежит семейству аннексинов, внутриклеточных белков, связывающих фосфолипиды. Аннексин V обычно используется в проточной цитометрии и флуоресцентной микроскопии для определения апоптотических клеток, благодаря его способности специфически связываться с фосфатидилсерином (ФС), который на ранних стадиях апоптоза перемещается со внутренней стороны клеточной мембраны во внешнюю. Белок аннексин V можно использовать для ингибирования прокоагулянтной и провоспалительной активности апоптотических клеток. Его также можно пометить флуоресцентным красителем с помощью одного из наших наборов для маркировки белков. Этот белок несет полигистидиновую метку на С-конце и может распознаваться антителами против этой метки.

ПЭГ3 диазид на основе триэтиленгликоля (1,8-диазидо-3,6-диоксаоктан) - симметричный бифункциональный кросс-линкер с двумя азидогруппами.

YO-TAP-1 (также известный как YO-PRO®-1) — мономерный краситель на основе карбоцианина с флуоресценцией в зеленой части спектра. YO-TAP-1 — непроникающий в живые клетки ядерный краситель, который не флуоресцирует в отсутствие нуклеиновых кислот. Краситель многократно усиливает свою флуоресценцию при связывании с двуцепочечной ДНК. YO-TAP-1 обладает ярким сигналом и низкой фоновой флуоресценцией. Он используется для окрашивания нуклеиновых кислот на микрочипах, а также для контрастного окрашивания ядер и хромосом в микроскопии. YO-TAP-1 может использоваться для мониторинга жизнеспособности клеток и обнаружения апоптотических и мертвых клеток в культуре.

Дибензоциклооктин (ДБЦО, DBCO, ADIBO) - один из самых реакционноспособных циклоалкинов для реакций безмедной клик-химии (т.н. SPAAC, стерически промотируемого алкин-азидного циклоприсоединения). Скорость взаимодействия ДБЦО с азидами значительно выше, чем у других циклооктинов, а также Cu-катализируемой клик-реакции (CuAAC). В отличие от других циклооктинов, DBCO не вступает во взаимодействие с тетразинами, что позволят использовать его в биоортогональных реакциях совместно с транс-циклооктенами и тетразинами. AF 568 - яркий, фотостабильный и гидрофильный флуорофор, излучающий в оранжевом канале. Максимум поглощения - 572 нм. Максимум эмиссии - 598 нм. AF 568 ДБЦО позволяет проводить флуоресцентное мечение азид-содержащих биомолекул внутри живых клеток, целых организмов, избегая негативного влияния на них ионов меди, а также в неживых образцах.

sulfo-Cyanine7.5 дикарбоновая кислота — бифункциональный флуоресцентный краситель для ближнего ИК-диапазона, содержащий две карбоксильные группы. Реагент можно применять для кросс-сшивки двух фрагментов с одновременным введением флуоресцентного красителя для ИК-диапазона. Активацию карбоксигрупп можно провести с помощью карбодиимида.

DusQ 3 азид является высоко реакционноспособным производным для конъюгации с алкин-содержащими молекулами в реакции медь-катализируемого алкин-азидного циклоприсоединения (CuААЦ). Применим для приготовления FRET зондов, подходящих для визуализации и методов детектирования in vivo. DusQ 3 наиболее эффективно поглощает в диапазоне 620-730 нм и лучше всего сочетается в качестве гасителя с флуорофорами родаминового ряда или цианиновыми красного и дальнего красного спектра, например, Cyanine 5, Cyanine 5.5, AF 647.

Тирамидная амплификация (TSA) — самый универсальный и эффективный способ усиления интенсивности флуоресцентного сигнала, применяемый в иммуногистохимии (ИГХ, IHC), иммуноцитохимии (ICC) и флуоресцентной гибридизации in situ (FISH). Метод TSA основан на способности пероксидазы хрена (HRP) в присутствии низких концентраций пероксида водорода превращать меченый тираминсодержащий субстрат в окисленный, высокореактивный свободный радикал, который ковалентно связывается с остатками тирозина белковых молекул, расположенных рядом с ним. По сравнению с обычными процедурами, метод TSA увеличивает чувствительность иммунофлуоресцентного обнаружения целевых молекул более чем в 100 раз, благодаря чему он особенно подходит для обнаружения мишеней с низкой концентрацией. В применениях, где не требуется повышение чувствительности обнаружения, TSA позволяет значительно снижать концентрации антител или зондов без потери интенсивности сигнала, и тем самым уменьшать фоновое окрашивание, возникающее из-за перекрестной реактивности или неспецифического связывания антител. Поскольку связывание тирамидной метки является ковалентным, тирамиды разных красителей можно использовать в нескольких последовательных раундах TSA-окрашивания, для обнаружения нескольких мишеней в одном и том же образце. Данный тирамид — конъюгат водорастворимого красного флуоресцентного красителя AF 594. AF 594 тирамид является компонентом многих наборов для тирамидной амплификации сигнала. Этот реагент можно использовать с любым антителом или другими молекулами (стрептавидин и др.), конъюгированными с HRP, для окрашивания клеток и тканей методами иммунофлуоресценции.

Набор для трекинга клеток CFDA SE используется для флуоресцентного мечения и долгосрочного отслеживания клеток. CFDA SE (сукцинимидиловый эфир (5,6)-карбоксифлуоресцеина диацетата) — стабильный, проникающий в клетки диацетатный предшественник CFSE. Краситель не флуоресцирует до тех пор, пока не произойдет отщепление ацетатных групп внутриклеточными эстеразами. При этом образуется CFSE — флуорофор с излучением в зеленой области спектра (максимум поглощения при ~492 нм, максимум излучения при ~517 нм). CFSE взаимодействует с клеточными аминами через свои сукцинимидильные группы и ковалентно связывается с внутриклеточными белками. CFDA SE обычно используется для мечения клеток и оценки их пролиферации in vivo и in vitro, а также для трекинга клеток и мониторинга их подвижности. Внутри клетки CFDA SE не проявляет цитотоксичности и минимально воздействует на пролиферативную способность или биологию клетки. Во время пролиферации флуоресцентная метка распределяется примерно поровну между потомками, приводя к последовательному уменьшению интенсивности флуоресценции вдвое в ходе ряда клеточных делений. Это позволяет производить количественную оценку пролиферативной способности клеток. Набор для трекинга клеток CFDA SE содержит микропробирки с сухим красителем и безводный ДМСО для приготовления небольших объемов рабочего окрашивающего раствора, что удобно для проведения экспериментов и их масштабирования без лишней потери красителя.