Биореактивы

Продукт представляет собой стерильный 10 мМ раствор аналога структуры кэпа ARCA в виде аммонийной соли в воде. Продукт протестирован на присутствие эндо- и экзонуклеазной активности и свободен от примесей ДНКаз и РНКаз. Чистота нуклеотида по данным ВЭЖХ не менее 96%. Функциональная активность подтверждена in vitro в реакции транскрипции.

Описание: Смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов(ферментативно синтезированных) для ПЦР по 10mМ каждого. Тестирована в ПЦР при амплификации фрагмента ДНК фага Т7 длиной 15 тыс. пар нуклеотидов. Способ получения: Ферментативный синтез Условия хранения: Хранить при -20°С Контроль качества: Тест на отсутствие примесей РНКаз: После инкубации смеси dNTP в течение 30 минут с флуоресцентно меченным олигонуклеотидом гидролиза не наблюдается. Тест на отсутствие примесей эндо- и экзодезоксирибонуклеаз и фосфатаз: После инкубации смеси dNTP в течение 3-х часов с одно- и двуцепочечными олигонуклеотидами гидролиза не наблюдается.

Краситель dsSafe — флуоресцентный краситель для прокраски нуклеиновых кислот в агарозных и полиакриламидных гелях. Данный краситель является лучшей безопасной альтернативой бромистому этидию (EtBr) — dsSafe не токсичен, не обладает мутагенной и канцерогенной активностью. dsSafe позволяет визуализировать нуклеиновые кислоты с чувствительностью, аналогичной бромистому этидию. Для возбуждения красителя подходят как классические трансиллюминаторы с УФ-излучением, так и более безопасные для глаз и образцов нуклеиновых кислот трансиллюминаторы с голубым светом. При использовании голубого света для возбуждения dsSafe фоновая флуоресценция ниже, чем при возбуждении бромистого этидия УФ-светом, при этом вырезаемые фрагменты ДНК для последующего клонирования не подвергаются повреждающему действию УФ-излучения, что повышает эффективность клонирования и снижает индуцируемое УФ число нежелательных мутаций. В комплексе с ДНК спектр красителя имеет два пика возбуждения: в ультрафиолетовом (280 нм) и в голубом диапазонах (502 нм), и максимум эмиссии в зеленом диапазоне ~530 нм. Краситель поставляется в виде концентрата 10 000× в ДМСО. Для прокраски геля необходимо добавить краситель в раствор расплавленной агарозы* или окрасить гель после гель-электрофореза в TAE/TBE буфере в течение 10-20 минут.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: ACTGGN ACTGGN↑ TGACCN TGAC↓CN Источник: Bacillus stearothermophilus 1 Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 65°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер Y Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 75 75 25 10 100 100 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°C. Лигирование: После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 65°C. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y

Термолабильная щелочная фосфатаза удаляет фосфаты с 5`- и 3`-концов ДНК, РНК и ДНТФ. Может быть использована вместо антарктической фосфатазы Источник: Выделена из штамма E.coli несущего клонированный ген щелочной фосфатазы из Alteromonas undina P2 Описание: Термолабильная щелочная фосфатаза (англ. TAP) катализирует дефосфорилирование 5`- и 3`-концов ДНК и РНК. Также гидролизует рибо- и дезоксирибонуклеозидтрифосфаты. Определение единицы активности: За единицу активности принимали количество фермента, необходимое для гидролиза 1 μмоля пара-нитрофенилфосфат (PNPP) в 0,5 мл реакционной смеси за 15 мин при 16°C. Реакционная смесь содержала 1Х SE-буфер W, 10 mM пара-нитрофенилфосфат. Оптимальный буфер: SE-буфер W Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 7.6 при 25°:C); 0.1 mM ZnCl2; 50% глицерин. Хранить при -20°С. Примечание: Термолабильную щелочную фосфатазу не рекомендуется разбавлять ввиду возможной потери активности. Функциональный тест: В результате обработки 1 мкг ДНК плазмиды pUC19/HindIII в 20 мкл реакционной смеси, содержащей 1Х SE -буфер W и 1 мкл препарата фермента, в течение 30 мин при 16°C и последующей сшивки с помощью Т4 ДНК лигазы и трансформации клеток E.coli,получали >10-кратное уменьшение числа выросших колоний по сравнению с использованием необработанной ДНК pUC19/Hind III. Протокол дефосфорилирования 5′-концов ДНК с помощью ТАР после гидролиза эндонуклеазой рестрикции (ЭР): На 20 мкл реакционной смеси: 10Х SE буфер ЭР (или буфер “W”) – 2 мкл, ДНК – 0,5-1мкг, деионизованная вода – до 20 мкл. Добавить 1 мкл эндонуклеазы рестрикции, перемешать пипетированием. Инкубировать в течении 0,5-1 часа при оптимальной температуре. Охладить реакционную смесь во льду в течение 1-2 мин!!! Добавить 1 мкл (5 ед.) щелочной фосфатазы (Е365/Е366), перемешать пипетированием. Инкубировать в течение 0,5-1 часа при 16°C(при 25°C активность фермента составляет 75-100%). Прогреть реакционную смесь при 65°C в течение 20 мин. Можно использовать обработанную ДНК для дальнейших экспериментов. Если требуется, очистить ДНК гель-фильтрацией, на спин-колонках или высадить 96%-ным этанолом.

Тест-система «АртТест Пепино» предназначена для выявления РНК вируса мозаики пепино (Pepino mosaic virus) методом одностадийной ОТ-ПЦР.

Описание: Смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов для ПЦР по 4мМ каждого. Тестирована в ПЦР при амплификации фрагмента ДНК фага Т7 длиной 15.5 тыс. пар нуклеотидов. Способ получения: Химический синтез Условия хранения: Хранить при -20°С Контроль качества: Тест на отсутствие примесей РНКаз: После инкубации смеси dNTP в течение 30 минут с флуоресцентно меченным олигонуклеотидом гидролиза не наблюдается. Тест на отсутствие примесей эндо- и экзодезоксирибонуклеаз и фосфатаз: После инкубации смеси dNTP в течение 3-х часов с одно- и двуцепочечными олигонуклеотидами гидролиза не наблюдается.

Антитела кролика к коллагену I типа, аффинно-очищенные, человека идеально подходят для использования в методах вестерн-блота и иммуногистохимии (парафиновые срезы тканей), так как они связываются как с нативным, так и с термически денатурированным коллагеном I типа. В ИФА имеют следующую специфичность: Коллаген человека I типа 100 % Другие коллагены человека (II, III, IV, V) <10% Коллаген I типа - фибриллярный белок, составляющий основу соединительной ткани организма. Наиболее представлен в коже, костях, сухожилиях, роговице и т.д.

Описание: Мы предлагаем 10хSE-буферы, оптимизированные для работы с нашими ферментами. 10хSE-буферы обеспечивают оптимальные реакционные условия для достижения 100% активности, производимых нами ферментов (эндонуклеаз рестриции). Каждый фермент поставляется в комплекте с рекомендованным 10хSE-буфером. Некоторые ферменты требуют специфические реакционные условия, поэтому для них созданы индивидуальные кратные SE-буферы. Также некоторым эндонуклеазам рестриции для достижения 100% активности дополнительно требуется бычий сывороточный альбумин (BSA) или S-аденозил-L-метионин (SAM). Когда это необходимо, данные реактивы поставляются в комплекте с ферментом и 10хSE-буфером. Состав: 1X(20 mМ Глицин-NaOH (pH 9.5 при 25°C); 25 mM MgCl2; 100mM NaCl; 1mM 2-меркаптоэтанол) Условия хранения: Хранить при -20°C. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер

Описание: Мы предлагаем 10хSE-буферы, оптимизированные для работы с нашими ферментами. 10хSE-буферы обеспечивают оптимальные реакционные условия для достижения 100% активности, производимых нами ферментов (эндонуклеаз рестриции). Каждый фермент поставляется в комплекте с рекомендованным 10хSE-буфером. Некоторые ферменты требуют специфические реакционные условия, поэтому для них созданы индивидуальные кратные SE-буферы. Также некоторым эндонуклеазам рестриции для достижения 100% активности дополнительно требуется бычий сывороточный альбумин (BSA) или S-аденозил-L-метионин (SAM). Когда это необходимо, данные реактивы поставляются в комплекте с ферментом и 10хSE-буфером. Состав: 1X(67 mM Tris-HCl (pH 8.8 при 25°C); 6.7 mM MgCl2; 16.7 mM (NH4)2SO4; 1 mM DTT.) Условия хранения: Хранить при -20°C. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер

Дибензоциклооктин (ДБЦО, DBCO, ADIBO) - один из самых реакционноспособных циклоалкинов для реакций безмедной клик-химии (т.н. SPAAC, стерически промотируемого алкин-азидного циклоприсоединения). Скорость взаимодействия ДБЦО с азидами значительно выше, чем у других циклооктинов, а также Cu-катализируемой клик-реакции (CuAAC). В отличие от других циклооктинов, DBCO не вступает во взаимодействие с тетразинами, что позволят использовать его в биоортогональных реакциях совместно с транс-циклооктенами и тетразинами. AF 488 - сульфированный родамин, яркий, фотостабильный и гидрофильный флуорофор, излучающий в зеленом канале. Максимум поглощения - 495 нм. Максимум эмиссии - 519 нм. AF 488 ДБЦО позволяет проводить флуоресцентное мечение азид-содержащих биомолекул внутри живых клеток, целых организмов и неживых образцах.

Использование в клинике: Ревматоидный фактор (РФ) представляет собой аутоантитела к собственным иммуноглобулинам класса G человека. Присутствие высоких концентраций РФ в сыворотке крови характерно для больных аутоиммунными заболеваниями, в том числе болезнью Лима, остеоартритом, моно- и полиартритом, ревматоидным артритом и др. Определение уровня РФ необходимо для повышения надежности диагностики ревматоидных заболеваний. Нормой для здорового донора является уровень РФ не более 25 МЕ/мл. Принцип метода: Метод основан на иммунологической реакции между иммобилизоваными на поверхности частиц латекса иммуноглобулинами класса G человека и ревматоидным фактором, присутствующим в образце. Образующийся в зоне эквивалентности иммунный комплекс вызывает видимую агглютинацию частиц латекса. Уровень РФ выше, чем 20 МЕ/мл выявляется появлением агглютинации латексных частиц в течение 2 минут. Для предотвращения ложно-положительной реакции для разведения проб используется входящий в состав набора буфер для разведения.