Биореактивы

Активированный N-гидроксисукцинимидный (NHS) эфир красителя AMCA (ацетат аминометилкумарина). Активированные эфиры обладают реакционной способностью в отношении первичных и вторичных аминогрупп. С их помощью можно метить аминогруппы в белках, пептидах, амино-модифицированных олигонуклеотидах и других целевых молекулах. AMCA — один из самых ярких синих флуоресцентных красителей. Этот флуорофор имеет относительно большой стоксов сдвиг, высокую устойчивость к фотовыгоранию и рН-независимую флуоресценцию в диапазоне рН от 4 до 10. АМСА широко используется для многоцветного мечения из-за минимального перекрытия его флуоресценции с зелеными и более длинноволновыми флуоресцентными красителями.

AF 594 — водорастворимый красный флуоресцентный краситель с высоким квантовым выходом флуоресценции и высокой фотостабильностью. Краситель не чувствителен к изменению рН в диапазоне от 4 до 10. По спектральным характеристикам AF 594 близок к техасскому красному (макс. поглощение при 586 нм, макс. испускания при 613 нм). AF 594 азид — флуоресцентно меченый азид, реагирующий с алкинильными производными биомолекул (терминальными алкинами и циклооктинами) посредством клик-реакций с образованием стабильных аддуктов. AF 594 азид обычно используется для присоединения красителя к биомолекулам, окрашивания клеток для проточной цитометрии и флуоресцентной микроскопии, а также других приложений.

Водорастворимый флуоресцентный краситель ближнего ИК-диапазона sulfo-Cyanine7 в виде активированного эфира для мечения биомолекул, содержащих аминогруппы. sulfo-Cyanine7 — улучшенный аналог Cy7®, имеющий повышенный на 20% квантовый выход и лучшую фотостабильность. Этот флуоресцентный краситель идеально подходит для неинвазивной визуализации меченых конъюгатов в организмах in vivo (NIR imaging). Этот метод основан на прозрачности биологических тканей в ближнем инфракрасном диапазоне электромагнитного спектра. Он не деструктивен и позволяет отслеживать распределение меченых молекул в живом организме. Активированный эфир sulfo-Cyanine7 позволяет легко метить белки и другие молекулы, содержащие аминогруппы. Реагент хорошо растворяется в воде, что особенно важно для мечения белков, склонных к денатурации под действием добавок органических растворителей. Этот реагент позволяет получать конъюгаты в водных буферах. Мы также предлагаем несульфированный Cyanine7 NHS-эфир для мечения белков и пептидов в водных средах с добавкой органического растворителя.

BDP 581/591 - яркий, относительно гидрофобный универсальный флуорофор. Он обладает значительным сечением двухфотонного поглощения и относительно длительным временем жизни возбужденного состояния. Этот флуорофор реагирует с активными формами кислорода с изменением флуоресценции. Он может быть использован для мониторинга активных форм кислорода внутри клеток. Это азидное производное которое можно конъюгировать с малыми молекулами и биомолекулами для создания трейсеров для флуоресцентного поляризационного анализа и микроскопии.

Родамин 6G (R6G) - ксантеновый краситель родаминового ряда. Эмиссия R6G смещена в красную область по сравнению с флуоресцеином. Он, как и флуоресцеин, обладает высоким квантовым выходом эмиссии. Это производное R6G содержит терминальный алкиновый фрагмент для конъюгации с азидами в присутствии катализаторов на основе меди (I).

TAMRA (тетраметилродамин) - ксантеновый краситель родаминового ряда. Флуорофор используется для модификации олигонуклеотидов и получения дважды меченых олигонуклеотидных зондов TaqMan, содержащих TAMRA вместе с флуоресцеином (FAM). Как и многие другие ксантеновые флуорофоры, производные TAMRA доступны в виде двух изомеров (5- и 6-изомеров), оптические свойства которых практически идентичны. Этот продукт - очищенный 5-изомер TAMRA. Активированный эфир TAMRA предназначен для проведения мечения по аминогруппам белков, пептидов, модифицированных олигонуклеотидов с аминогруппами, а также других молекул.

AF 488 С6 малеимид применяется для мечения флуорофором AF 488 белков и пептидов, содержащих остатки цистеина, а также других молекул, содержащих тиольную (меркаптановую) функциональную группу (например, олигонуклеотидов с тиольной модификацией). Остатки цистина и другие дисульфиды перед проведением реакции следует восстановить до тиолов. Для этого хорошо подходит трис(карбоксиэтил)фосфин (TCEP), но не меркаптоэтанол и не дитиотреит, которые сами содержат тиольные группы. AF 488 представляет собой сульфированный родаминовый краситель — родамин 110 (R110). Как и другие родамины, AF 488 представлен двумя изомерами, 5- и 6-. Они обладают практически идентичными фотофизическими свойствами. Изомеры требуют разделения, использование смеси изомеров может вести к «двоению» пиков меченых продуктов при анализе ВЭЖХ и электрофоретическом разделении. Данный продукт представляет собой изомерно чистый 5-AF 488.

BDP 581/591 малеимид - краситель для конъюгации с тиолами, например, суфльгидрильными группами белков и пептидов. Флуорофор подходит для различных применений, в том числе для микроскопии, флуоресценто-поляризационного анализа и детекции активных форм кислорода (при реакции с ними происходит изменение спектра флуоресценции).

BDP R6G — бордипиррометеновый краситель с длинами волн поглощения и эмиссии, соответствующими красителю родамину 6G (R6G). BDP R6G — яркий и фотостабильный флуорофор. Тетразиновый фрагмент позволяет вовлекать этот реагент в реакцию Дильса-Альдера с обращенными электронными требованиями с напряженными олефинами — транс-циклооктенами, азетинами, и другими напряженными олефинами. Эта реакция не требует использования катализаторов и протекает быстро, в том числе в водной среде.

sulfo-Cyanine7 бис-NHS эфир — водорастворимый бифункциональный кросс-линкер, содержащий ядро инфракрасного водорастворимого красителя sulfo-Cyanine7 и две реакционноспособные группы NHS для мечения аминов.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: TGCGCA TGC↑GCA ACGCGT ACG↓CGT Источник: Acinetobacter calcoaceticus 16 Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер W Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 50 75 25 100 75 70 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 80% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер W. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.

HS Taq ДНК-полимераза предназначена для рутинных аналитических исследований. Фермент получен из штамма E.coli, экспрессирующего ген polA термостабильной бактерии Thermus aquaticus YT1. HS Taq ДНК-полимераза представляет собой смесь рекомбинантного фермента Таq ДНК-полимеразы и специфических моноклональных антител к полимеразе. HS Taq ДНК-полимераза неактивна в условиях приготовления реакционной смеси. Активация фермента происходит в течение первой денатурации. При температуре более 70 °C комплекс ДНК-полимеразы с антителом диссоциирует. Наличие "горячего старта" существенно повышает чувствительность и специфичность реакции. Область применения • Амплификация ДНК. • ПЦР-РВ с TaqMan-зондами. • ПЦР-РВ с интеркалирующими красителями. • ПЦР-скрининг • Мультиплексная ПЦР.