Биореактивы

Данный набор предназначен для измерения концентрации двухцепочечной ДНК в широком диапазоне на флуориметре (подходит любая версия флуориметра). Набор включает в себя 200× концентрат флуоресцентного красителя QuDye dsDNA BR, буфер для приготовления рабочего раствора красителя и стандарты концентрации ДНК (0 и 100 нг/мкл). Краситель QuDye dsDNA BR обладает селективностью по отношению к двухцепочечной ДНК, поэтому на результаты измерения не влияют примеси РНК, нуклеотидов и белков. Другие примеси в незначительном количестве, такие как соли, детергенты и растворители, оказывают несущественное влияние на результаты измерений. Данный набор позволяет точно измерять концентрацию дцДНК в диапазоне от 100 пг/мкл до 1000 нг/мкл для исходного образца (диапазон количества ДНК для измерения на флуориметре: 2–1000 нг ДНК в 200 мкл образца для измерения). Основной компонент набора — флуоресцентный краситель QuDye dsDNA BR, селективно связывающий ДНК и проявляющий выраженную флуоресценцию в составе комплекса с молекулой ДНК. Использование данного набора является удобным способом квантификации дцДНК в широком диапазоне концентраций, он не требует большого объема исходного образца (1–20 мкл), все измерения проводятся при комнатной температуре и занимают, в среднем, 15-20 минут (в зависимости от количества образцов); флуоресценция образцов стабильна в течение 3 часов. Для проведения измерения необходимо приготовить рабочий раствор красителя, развести в нем в отдельных пробирках стандарты концентрации ДНК и экспериментальные образцы и провести измерения интенсивности флуоресценции на флуориметре. Для удобства мы предлагаем фасовки набора, включающие совместимые с флуориметром тонкостенные пробирки. Кроме этого, данный набор можно использовать в сочетании с набором QuDye Protein Quantification Kit для определения примеси белка в образце ДНК. Для количественного анализа образцов с меньшей концентрацией дцДНК воспользуйтесь набором QuDye dsDNA HS Assay Kit с диапазоном измеряемых концентраций 10 пг/мкл—100 нг/мкл для исходного образца.

Окрашивание по Нисслю — широко используемый гистологический метод визуализации морфологии нервной ткани. Метод основан на взаимодействии основных красителей с нуклеиновыми кислотами клеток. Из-за интенсивного синтеза белка, перикарион нейронов имеет высокое содержание рибосомальной РНК в шероховатом эндоплазматическом ретикулуме (т.н. «вещество Ниссля»), и в следствие этого, окрашивание нейронов основными красителями в цитоплазме более выражено, чем в ядрах. На этом основании окрашенные по Нисслю нейроны можно отличить от глиальных клеток, а данный метод считается специфичным для обнаружения нейронов. Deep-Red Fluorescent Nissl Stain — непроникающий в живые клетки краситель, который не флуоресцирует в отсутствие нуклеиновых кислот. Краситель многократно усиливает свою флуоресценцию при связывании с РНК и ДНК. Длинноволновая флуоресценция Deep-Red Fluorescent Nissl Stain сильно отстоит от зеленого и красного каналов, что делает этот краситель идеальным для экспериментов с многоцветным флуоресцентным мечением.

10X Overnight ligation buffer применяется для стандартного лигирования (14–16 часов при 14 °C). Буферы оптимизированы для использования с Quick-TA и T4 ДНК лигазами. В состав обоих буферов входят АТФ и ДТТ, которые плохо сохраняются в водных растворах, поэтому буфер не следует оставлять при комнатной температуре после окончания работы.

5X Quick ligation buffer предназначен для быстрого лигирования (5–15 минут при комнатной температуре). Буферы оптимизированы для использования с Quick-TA и T4 ДНК лигазами. В состав обоих буферов входят АТФ и ДТТ, которые плохо сохраняются в водных растворах, поэтому буфер не следует оставлять при комнатной температуре после окончания работы.

Стрептавидин: ФИТЦ (f-S Avs) избирательно связывается с биотином или с биотин-модифицированными молекулами. Сывороточные белки человека и животных не влияют на эффективность связывания f-S Avs с биотином. f-S Avs не содержит белковых агрегатов и свободного ФИТЦ. f-S Avs предназначен для выявления биотинилированных белков при иммуноферментном анализе, иммуноблоттинге, иммуногистохимическом исследовании срезов тканей, а также при иммунодетекции клеточных антигенов.

Смесь OneTube RT-PCRmix предназначена для одноэтапного анализа РНК методом ПЦР-РВ. Смесь позволяет быстро и надежно проанализировать большое количество образцов РНК, в том числе в высокопроизводительных приложениях. Для амплификации используют праймеры, специфичные к кодирующим участкам генома, зонды типа TaqMan или интеркалирующий краситель, референсный краситель ROX (при необходимости) и универсальный ОT-ПЦР протокол. Частный вариант применения: одновременный анализ РНК и ДНК в образце. Этот формат удобен для определения в одном образце РНК- и ДНК-содержащих вирусов, количественной оценки нуклеиновых кислот.

Азид-ПЭГ3-йодид - бифункциональный линкер, содержащий высокореакционноспособную иодидную группу. Этот иодид с высокой скоростью алкилирует различные C-, O-, N-, S-нуклеофилы. Органические иодиды примерно на порядок активнее бромидов, и на 4 порядка активнее хлоридов в реакциях замещения, протекающих по механизму SN2. Это означает, что реакция алкилирования иодидом займет в 10 раз меньше времени, чем аналогичная реакция алкилбромида. Поэтому эта молекула позволяет проводить алкилирование очень быстро. ПЭГ3 - гидрофильный линкер средней длины. Азидогруппу можно вводить в реакции клик-химии и лигирования по Штаудингеру. Ее также легко восстановить в аминогруппу.

Компонент рекомендуемого нами катализатора для конъюгации азидов с алкинами с помощью медь-катализируемой клик-реакции. Этот комплекс стабилен и содержит двухвалентную медь (II) в виде 10 мМ CuSO4 в 55% водном ДМСО. При обработке Cu(II)-TBTA восстановителями, например, аскорбиновой кислотой, образуется каталитически активный комплекс с одновалентной медью (I).

HS Taq ДНК-полимераза предназначена для рутинных аналитических исследований. Фермент получен из штамма E.coli, экспрессирующего ген polA термостабильной бактерии Thermus aquaticus YT1. HS Taq ДНК-полимераза представляет собой смесь рекомбинантного фермента Таq ДНК-полимеразы и специфических моноклональных антител к полимеразе. HS Taq ДНК-полимераза неактивна в условиях приготовления реакционной смеси. Активация фермента происходит в течение первой денатурации. При температуре более 70 °C комплекс ДНК-полимеразы с антителом диссоциирует. Наличие "горячего старта" существенно повышает чувствительность и специфичность реакции. Область применения • Амплификация ДНК. • ПЦР-РВ с TaqMan-зондами. • ПЦР-РВ с интеркалирующими красителями. • ПЦР-скрининг • Мультиплексная ПЦР.

ДНК-полимераза «ALZYME HSTaq» с «го­ря­чим стар­том» пред­наз­на­че­на для син­теза мо­ле­ку­лы де­зок­си­ри­бо­нук­леи­но­вой кис­ло­ты (ДНК) пу­тём ком­пле­мен­тар­но­го ко­пи­ро­ва­ния ро­ди­тельс­ких це­пей ДНК в про­цес­се по­ли­ме­раз­ной цеп­ной реак­ции (ПЦР). Фермент пред­наз­на­чен для при­ме­не­ния в науч­но-ис­сле­до­ва­тель­ских це­лях. Источник: Фер­мент по­лу­чен из ре­­ком­­би­­нант­­но­­го шта­м­ма Е. coli, не­­су­­ще­го мо­­ди­­фи­ци­­ро­­ван­­ный ген Taq-по­ли­ме­разы. Область применения: - Проведение классической ПЦР. - Проведение ПЦР в реальном времени (ПЦР-РВ) с зондами TaqMan, интеркалирующими красителями. - Амплификация фрагментов для ТА-клонирования. - Включение модифицированных нуклеотидов в ДНК.

Тест-система для выявления ДНК вируса алеутской болезни норок (Aleutian disease of minks virus, ADM) в биологическом материале и кормах для животных методом ПЦР.