Поиск

Сайт узнавания и позиция гидролиза: ACTAGT A↑CTAGT TGATCA TGATC↓A Источник: Alteromonas haloplanktis SP Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага T7 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага Т7 Оптимальный буфер: SE-буфер B Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 75 25 25 75 100 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК фага T7 сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37LС. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B, BSA (кроме E173T и E174T) Для фасовок Turbo (E173T и E174T) прикладывается только буфер ROSE. Примечание: Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.

Высоконагруженный носитель, стекло контролируемой пористости с диаметром пор 500 Å, для синтеза 3'-аминомодифицированных олигонуклеотидов длиной до 50 оснований. Аминогруппа защищена трифторацетильной защитой (TFA), которая легко удаляется в стандартных условиях деблокирования. Этот реагент имеет ядро гидроксипролинола - универсального ненуклеозидного модифицирующего реагента.

Pluronic® F-127 представляет собой неионогенный детергент, широко используемый для солюбилизации и облегчения загрузки в клетки гидрофобных молекул, таких как AM-эфиры кальциевых индикаторов Fluo-4, Fluorica-8 или потенциометрических индикаторов Di-4-ANEPS, Di-8-ANEPS. Мы предлагаем Pluronic® F-127 в виде готового к использованию 10% раствора в H2O.

Hoechst S769121 (Nuclear Yellow) — проникающий в клетки желтый флуоресцентный краситель, связывающийся с участками, богатыми аденином и тимином, в малой бороздке двухцепочечной ДНК. Хотя Nuclear Yellow может связываться со всеми нуклеиновыми кислотами, нити дцДНК, богатые АТ, значительно усиливают его флуоресценцию. Nuclear Yellow используется во флуоресцентной микроскопии, флуорометрии и проточной цитометрии для окрашивания и измерения ДНК-содержимого в живых и фиксированных клетках. Его обычно используют в сочетании с ретроградными трейсерами, такими как True Blue, для двухцветной визуализации нейронов. Nuclear Yellow также можно использовать для фотоконверсии диаминобензидина (DAB) в электронно-плотный продукт, что применяется в световой и электронной микроскопии. Рекомендуемая концентрация красителя для окрашивания бактерий или клеток эукариот составляет 0,1–10 мкг/мл.

Алкин-ПЭГ3-карбоновая кислота - бифункциональный реагент на основе триэтиленгликоля, содержащий карбоксигруппу и алкиновый фрагмент. Карбоксильную группу можно активировать с помощью реагентов для пептидного синтеза, таких как PyBOP, или карбодиимидов (EDC, DCC), и модифицировать ей амины с образованием стабильной амидной связи. Терминальную алкиновую группу можно конъюгировать с азидами в присутствии катализатора на основе соединений меди (I) с образованием триазолов. Полиэтиленгликоли - гидрофильные линкеры, идеально подходящие для синтеза водорастворимых конъюгатов.

Церамиды являются предшественниками сфинголипидов, состоящими из сфингозина и жирной кислоты, соединенных между собой амидной связью. BDP TMR церамид представляет собой синтетический флуоресцентный липид, конъюгат оранжевого флуоресцентного красителя BDP TMR со сфингозином. Внутри клетки BDP TMR церамид включается в мембраны аппарата Гольджи, поэтому данный краситель широко используется в клеточной биологии для визуализации аппарата Гольджи в живых и фиксированных клетках методами флуоресцентной микроскопии.

Набор для кПЦР dsGreen лиофилизированный применяется для точного определения содержания ДНК матрицы в пробе и подходит для определения копийности и уровня экспрессии генов, а также генотипирования методом кПЦР. Для детекции в наборе используется интеркалирующий краситель dsGreen. Реакционная смесь в наборе не содержит референсный краситель ROX, что позволяет ее использовать с real-time амплификаторами любого типа. Полимераза с технологией «горячего старта», входящая в состав набора, предотвращает неспецифическую амплификацию ДНК. Объем смеси 1 мл рассчитан на проведение 100 реакций объемом 20 мкл.

TE-L-Тирозин (трет-бутиловый эфир O-(2-тозилоксиэтил)-N-тритил-L-тирозина, или ТЭТ) — предшественник O-(2-[18F]фторэтил)-L-тирозина (ФЭТ), меченого F-18 аминокислотного трейсера, применяемого в позитронно-эмиссионной и компьютерной томографии (ПЭТ-КТ). ФЭТ широко применяется в клинических исследованиях для визуализации транспорта аминокислоты в опухолях мозга, а также дифференциации опухолевых тканей.

Описание: X-Gal используется совместно с IPTG для определения lac-фенотипа при отборе белых/синих колоний E.coli. X-Gal представляет собой инертный хромогенный субстрат для β-галактозидазы – фермента, расщепляющего лактозу. β-галактозидаза гидролизует X-Gal с образованием бесцветной галактозы и 4-хлор-3-бром-индиго, который имеет синюю окраску. Индукция гена lacZ путем добавления IPTG приводит к расщеплению X-Gal и появлению синих колоний E.coli. В случае нарушения структуры гена lacZ за счет встройки генетического материала (или делеции) цвет колоний будет белым. Стоковый раствор X-Gal следует готовить в необходимом количестве непосредственно перед его добавлением в расплавленный LB-агар при его температуре 50-55 o C. В качестве растворителя для X-Gal используется диметилсульфоксид (DMSO). Рекомендуется приготовить стоковый раствор X-Gal в DMSO с концентрацией 40-100 мг/мл. Конечная концентрация X-Gal в среде LB может быть 40-100 мкг/мл (для получения белых/синих колоний E.coli). Вариант применения: На 100 мл расплавленного LB-агара (50-55 o C) взять: 100 мкл стокового раствора X-Gal (10 мг сухого X-Gal растворить в 100 мкл DMSO в отдельной стерильной микропробирке); 40 мкл 0,5 М водного раствора IPTG; необходимое количество антибиотика (например, ампициллина до 50 мкг/мл). Все тщательно перемешать, разлить по чашкам Петри. Подсушить в стерильном боксе под УФ в течение 20-30 мин.

Бифункциональный линкер, содержащий азодибензоциклооктин (ДБЦО, или АДИБО) для реакций безмедной клик-химии и аминогруппу для конъюгации с активированными производными карбоновых кислот и эпоксидами. Дибензоциклооктин (ДБЦО) — один из самых реакционноспособных циклоалкинов для реакций безмедной клик-химии (SPAAC, СПААЦ, стерически промотируемого алкин-азидного циклоприсоединения). ДБЦО моментально реагирует с азидами, при этом скорость процесса значительно выше, чем у медь-катализируемой клик-реакции, и реакций циклоприсоединения с другими циклооктинами. В отличие от некоторых циклооктинов, ДБЦО не вступает во взаимодействие с тетразинами.

Дибензоциклооктин (ДБЦО, DBCO, ADIBO) - один из самых реакционноспособных циклоалкинов для реакций безмедной клик-химии (т.н. SPAAC, стерически промотируемого алкин-азидного циклоприсоединения). Скорость взаимодействия ДБЦО с азидами значительно выше, чем у других циклооктинов, а также Cu-катализируемой клик-реакции (CuAAC). В отличие от других циклооктинов, DBCO не вступает во взаимодействие с тетразинами, что позволят использовать его в биоортогональных реакциях совместно с транс-циклооктенами и тетразинами. AF 488 - сульфированный родамин, яркий, фотостабильный и гидрофильный флуорофор, излучающий в зеленом канале. Максимум поглощения - 495 нм. Максимум эмиссии - 519 нм. AF 488 ДБЦО позволяет проводить флуоресцентное мечение азид-содержащих биомолекул внутри живых клеток, целых организмов и неживых образцах.

Водорастворимый краситель ближнего ИК-диапазона в виде азида, пригодного для использования в реакции азид-алкильного циклоприсоединения. sulfo-Cyanine7 - цианиновый краситель, аналог Cy7® с улучшенными фотофизическими свойствами. Этот краситель прекрасно подходит для неинвазивной ИК-визуализации распределения меченых биомолекул in vivo.