Поиск

ДМФ (диметилформамид, ДМФА) - рекомендуемый растворитель для реакций мечения с использованием активированных эфиров. При хранении на воздухе ДМФ медленно портится по причине образования в нем диметиламина и поглощения воды из воздуха (этот растворитель гигроскопичен). Влага и в особенности диметиламин плохо сказываются на эффективности мечения - в растворителе низкого качества реакция может не пройти. Сушка и подготовка диметилформамида требует специального оборудования, которое не всегда доступно в биологических лабораториях. Мы предлагаем пользоваться для реакций мечения высококачественным сухим растворителем, упакованным в небольшие пробирки в инертной атмосфере.

DiA представляет собой диалкиламиностириловый краситель, который флуоресцирует после растворения в органических растворителях, в т.ч. мембранах. Максимальная длина волны возбуждения DiA — 492 нм, максимум эмиссии — 607 нм. Благодаря широкому спектру излучения DiA можно детектировать в зеленом, оранжевом и красном каналах в зависимости от используемого фильтра. DiA широко используется в качестве антероградного и ретроградного нейротрэйсера в живых и фиксированных тканях и клетках. DiA равномерно маркирует нейроны посредством диффузии в их плазматической мембране. В интактной ткани краситель не переходит из меченых клеток в немеченые, однако такой перенос может происходить при разрушении мембран клеток, например, после секционирования образца. DiA можно использовать для трассировки нейронов в сочетании с трейсерами другого цвета, например, DiI.

Стрептавидин представляет собой тетрамерный биотин-связывающий белок, выделенный из бактерии Streptomyces avidinii. Стрептавидин способен с высокой аффинностью и селективностью связывать до четырех молекул биотина посредством множественных водородных связей и ван-дер-ваальсовых взаимодействий. Из-за отсутствия углеводных модификаций и близкого к нейтральному pI, стрептавидин демонстрирует меньшее неспецифическое связывание, в сравнении с другим биотин-связывающим белком — авидином. Стрептавидин обладает высокой термостабильностью и устойчивостью к экстремальным значениям pH, денатурирующим агентам и ферментативной деградации, что позволяет использовать его в широком спектре экспериментальных условий. Флуоресцентные конъюгаты стрептавидина обычно используют в качестве реагента второй ступени для специфического обнаружения различных биотин-меченых биомолекул, таких как белки (антитела и др.), нуклеиновые кислоты, липиды в протоколах непрямого иммунофлуоресцентного окрашивания, вестерн-блоттинге, проточной цитометрии, микропланшетном анализе и других методах детекции. Данный стрептавидин представлен в форме лиофилизированного конъюгата с sulfo-Cyanine3 — гидрофильным оранжевым флуорофором, спектральные характеристики которого сходны с Cy3® (максимум поглощения — 548 нм, максимум эмиссии — 563 нм). Рекомендуемый диапазон концентраций для использования составляет 0,5-10 мкг/мл. Избегайте использования растворов, содержащих биотин (некоторые сыворотки, RPMI 1640 и т. д.) в качестве разбавителей.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: GTAC GT↑AC CATG CA↓TG Источник: Rhodopseudomonas sphaeroides Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер B Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 50 50 75 50 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 100 ug/ml BSA, 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 20-кратным избытком фермента 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.

Референсный краситель ROX предназначен для ПЦР с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ). Референсный краситель ROX: – используется для нормирования интенсивности флуоресцентного сигнала при проведении количественной ПЦР-РВ. – позволяет скорректировать погрешности, связанные с ошибкой автоматического дозатора и флуктуацией флуоресценции.

Сорбент Антитела кролика к иммуноглобулинам мыши: сефароза предназначен для аффинной очистки моноклональных антител; для количественной оценки содержания иммуноглобулинов мыши в иммунных сыворотках, асцитных и культуральных жидкостях.

Азидопропиламин — растворимый в воде, короткий бифункциональный линкер с азидо- и аминогруппами. Первичная аминогруппа обладает высокой реакционной способностью по отношению к производным активированных эфиров (NHS и др). Азидная группа может соединяться с алкинами посредством катализируемой медью клик-реакции (CuAAC). Обе реакции ортогональны и могут проводиться независимо. Азидопропиламин применяется для введения азидного фрагмента в молекулы, содержащие карбоксильные группы, за счет активации карбокси-групп карбодиимидом и их дальнейшего взаимодействия с аминогруппой 3-азидопропиламина. Также азидопропиламин может использоваться в пептидном синтезе для модификации пептидов с активированными HBTU и HOBt карбоксильными группами. Данный продукт — твердая, химически стабильная форма азидопропиламина в виде гидрохлорида, идеально подходящая для применений, когда необходимо большое количество реагента.

Тест-система для выявления ДНК бактерий рода Listeria monocytogenes методом ПЦР.

Описание: Мы предлагаем 10хSE-буферы, оптимизированные для работы с нашими ферментами. 10хSE-буферы обеспечивают оптимальные реакционные условия для достижения 100% активности, производимых нами ферментов (эндонуклеаз рестриции). Каждый фермент поставляется в комплекте с рекомендованным 10хSE-буфером. Некоторые ферменты требуют специфические реакционные условия, поэтому для них созданы индивидуальные кратные SE-буферы. Также некоторым эндонуклеазам рестриции для достижения 100% активности дополнительно требуется бычий сывороточный альбумин (BSA) или S-аденозил-L-метионин (SAM). Когда это необходимо, данные реактивы поставляются в комплекте с ферментом и 10хSE-буфером. Состав: 1X(20 mM Tris-HCl (pH 8.5 при 25°C); 10 mM MgCl2; 200 mM NaCl; 1 mM DTT; 100 μg/ml BSA.) Условия хранения: Хранить при -20°C Примечание: Буфер поставляется в концентрации 10Х. В нем присутствует концентрированный BSA, поэтому этот буфер требует бережной разморозки. Мы рекомендуем размораживать SE-буфер 2W+ (10Х) при комнатной температуре и аккуратно перемешать его перед использованием. В случае нагревания концентрированного буфера до температуры, превышающей 37°C, может образовываться осадок вследствие частичной денатурации BSA.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: GRGCYC GRGCY↑C CYCGRG C↓YCGRG Источник: Flavobacterium rigense O Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер Y Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 75 75 10 100 25 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y, BSA. Примечание: Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.

Описание: Мы предлагаем 10хSE-буферы, оптимизированные для работы с нашими ферментами. 10хSE-буферы обеспечивают оптимальные реакционные условия для достижения 100% активности, производимых нами ферментов (эндонуклеаз рестриции). Каждый фермент поставляется в комплекте с рекомендованным 10хSE-буфером. Некоторые ферменты требуют специфические реакционные условия, поэтому для них созданы индивидуальные кратные SE-буферы. Также некоторым эндонуклеазам рестриции для достижения 100% активности дополнительно требуется бычий сывороточный альбумин (BSA) или S-аденозил-L-метионин (SAM). Когда это необходимо, данные реактивы поставляются в комплекте с ферментом и 10хSE-буфером. Состав: 1X(67 mM Tris-HCl (pH 8.8 при 25°C); 16.6 mM (NH4)2SO4; 0.01% Tween-20.) Отдельно поставляется 50mM MgCl2 Условия хранения: Хранить при -20°C. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер.

Стандартный праймер комплементарен последовательности 16S rRNA. 16S RNA Reverse: 5’-CTT GTG CGG GCC CCC GTC AAT TC-3’