Поиск

Краситель Cyanine7.5 - флуорофор для ближней инфракрасной области. Данное производное содержит азидогруппу для конъюгации с биомолекулами с помощью клик-реакции. Cyanine7.5 по своим фотофизическим свойствам напоминает краситель ICG (indocyanine green), но имеет более высокий квантовый выход флуоресценции. Конъюгаты с Cyanine7.5 можно использовать для неинвазивного имиджинга in vivo, поскольку спектры поглощения и эмиссии флуорофора находятся в инфракрасном окне прозрачности биологических тканей. Этот флуорофор можно использовать и в тех случаях, когда необходимо избежать высокого уровня фоновой флуоресценции от биологических объектов. Азид поставляется в виде раствора в DMSO и в сухом виде. Раствор пригоден для конъюгации в соответствии с нашим рекомендуемым протоколом.

BDP 630/650 - это яркий и фотостабильный дальне-красный флуорофор с высокими молярным коэффициентом экстинкции и квантовым выходом. Он обладает относительно долгим времем жизни возбужденного состояния, и благодаря этому этот краситель полезен для анализа поляризации флуоресценции. Данное производное представляет собой этиловый эфир BDP 630/650 и может применяться для окрашивания липидов и других липофильных соединений.

Cyanine3B — цианиновый краситель с желтой эмиссией, являющийся улучшенной версией флуорофора Cyanine3, обладающий значительно более высокими квантовым выходом флуоресценции и фотостабильностью. Данный краситель содержит аминогруппу, отделенную от ядра флуорофора длинным линкером, что облегчает его конъюгацию. Алифатическая первичная аминогруппа вступает в реакции сочетания с различными электрофилами (активированными эфирами, эпоксидами и др.). Краситель также может использоваться в мечении с помощью катализируемого ферментами трансаминирования.

Тирамидная амплификация (TSA) — самый универсальный и эффективный способ усиления интенсивности флуоресцентного сигнала, применяемый в иммуногистохимии (ИГХ, IHC), иммуноцитохимии (ICC) и флуоресцентной гибридизации in situ (FISH). Метод TSA основан на способности пероксидазы хрена (HRP) в присутствии низких концентраций пероксида водорода превращать меченый тираминсодержащий субстрат в окисленный, высокореактивный свободный радикал, который ковалентно связывается с остатками тирозина белковых молекул, расположенных рядом с ним. По сравнению с обычными процедурами, метод TSA увеличивает чувствительность иммунофлуоресцентного обнаружения целевых молекул более чем в 100 раз, благодаря чему он особенно подходит для обнаружения мишеней с низкой концентрацией. В применениях, где не требуется повышение чувствительности обнаружения, TSA позволяет значительно снижать концентрации антител или зондов без потери интенсивности сигнала, и тем самым уменьшать фоновое окрашивание, возникающее из-за перекрестной реактивности или неспецифического связывания антител. Поскольку связывание тирамидной метки является ковалентным, тирамиды разных красителей можно использовать в нескольких последовательных раундах TSA-окрашивания, для обнаружения нескольких мишеней в одном и том же образце. Данный тирамид — конъюгат водорастворимого красителя sulfo-Cyanine7 с флуоресценцией в ближней инфракрасной области спектра. sulfo-Cyanine7 тирамид (также известный как Cy7® и Cyanine7 тирамид у других производителей) является компонентом многих наборов для тирамидной амплификации сигнала. Этот реагент можно использовать с любым антителом или другими молекулами (стрептавидин и др.), конъюгированными с HRP, для окрашивания клеток и тканей методами иммунофлуоресценции.

ДМФ (диметилформамид, ДМФА) - рекомендуемый растворитель для реакций мечения с использованием активированных эфиров. При хранении на воздухе ДМФ медленно портится по причине образования в нем диметиламина и поглощения воды из воздуха (этот растворитель гигроскопичен). Влага и в особенности диметиламин плохо сказываются на эффективности мечения - в растворителе низкого качества реакция может не пройти. Сушка и подготовка диметилформамида требует специального оборудования, которое не всегда доступно в биологических лабораториях. Мы предлагаем пользоваться для реакций мечения высококачественным сухим растворителем, упакованным в небольшие пробирки в инертной атмосфере.

DiA представляет собой диалкиламиностириловый краситель, который флуоресцирует после растворения в органических растворителях, в т.ч. мембранах. Максимальная длина волны возбуждения DiA — 492 нм, максимум эмиссии — 607 нм. Благодаря широкому спектру излучения DiA можно детектировать в зеленом, оранжевом и красном каналах в зависимости от используемого фильтра. DiA широко используется в качестве антероградного и ретроградного нейротрэйсера в живых и фиксированных тканях и клетках. DiA равномерно маркирует нейроны посредством диффузии в их плазматической мембране. В интактной ткани краситель не переходит из меченых клеток в немеченые, однако такой перенос может происходить при разрушении мембран клеток, например, после секционирования образца. DiA можно использовать для трассировки нейронов в сочетании с трейсерами другого цвета, например, DiI.

Стрептавидин представляет собой тетрамерный биотин-связывающий белок, выделенный из бактерии Streptomyces avidinii. Стрептавидин способен с высокой аффинностью и селективностью связывать до четырех молекул биотина посредством множественных водородных связей и ван-дер-ваальсовых взаимодействий. Из-за отсутствия углеводных модификаций и близкого к нейтральному pI, стрептавидин демонстрирует меньшее неспецифическое связывание, в сравнении с другим биотин-связывающим белком — авидином. Стрептавидин обладает высокой термостабильностью и устойчивостью к экстремальным значениям pH, денатурирующим агентам и ферментативной деградации, что позволяет использовать его в широком спектре экспериментальных условий. Флуоресцентные конъюгаты стрептавидина обычно используют в качестве реагента второй ступени для специфического обнаружения различных биотин-меченых биомолекул, таких как белки (антитела и др.), нуклеиновые кислоты, липиды в протоколах непрямого иммунофлуоресцентного окрашивания, вестерн-блоттинге, проточной цитометрии, микропланшетном анализе и других методах детекции. Данный стрептавидин представлен в форме лиофилизированного конъюгата с sulfo-Cyanine3 — гидрофильным оранжевым флуорофором, спектральные характеристики которого сходны с Cy3® (максимум поглощения — 548 нм, максимум эмиссии — 563 нм). Рекомендуемый диапазон концентраций для использования составляет 0,5-10 мкг/мл. Избегайте использования растворов, содержащих биотин (некоторые сыворотки, RPMI 1640 и т. д.) в качестве разбавителей.

Референсный краситель ROX предназначен для ПЦР с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ). Референсный краситель ROX: – используется для нормирования интенсивности флуоресцентного сигнала при проведении количественной ПЦР-РВ. – позволяет скорректировать погрешности, связанные с ошибкой автоматического дозатора и флуктуацией флуоресценции.

Азидопропиламин — растворимый в воде, короткий бифункциональный линкер с азидо- и аминогруппами. Первичная аминогруппа обладает высокой реакционной способностью по отношению к производным активированных эфиров (NHS и др). Азидная группа может соединяться с алкинами посредством катализируемой медью клик-реакции (CuAAC). Обе реакции ортогональны и могут проводиться независимо. Азидопропиламин применяется для введения азидного фрагмента в молекулы, содержащие карбоксильные группы, за счет активации карбокси-групп карбодиимидом и их дальнейшего взаимодействия с аминогруппой 3-азидопропиламина. Также азидопропиламин может использоваться в пептидном синтезе для модификации пептидов с активированными HBTU и HOBt карбоксильными группами. Данный продукт — твердая, химически стабильная форма азидопропиламина в виде гидрохлорида, идеально подходящая для применений, когда необходимо большое количество реагента.

Тест-система для выявления ДНК бактерий рода Listeria monocytogenes методом ПЦР.

Стандартный праймер комплементарен последовательности 16S rRNA. 16S RNA Reverse: 5’-CTT GTG CGG GCC CCC GTC AAT TC-3’

Стандартный праймер комплементарен промотору цитомегаловируса человека (CMV). Нуклеотидная последовательность: CMV Forward: 5’-CGC AAA TGG GCG GTA GGC GTG-3’