Поиск

Genta бензонуклеаза представляет собой нуклеазу, которая расщепляет все виды как ДНК, так и РНК (одноцепочечные, двухцепочечные, линейные и кольцевые) с образованием олигодезоксинуклеотидов с концевыми 5’-монофосфатами длиной 3-5 оснований. Эффективна в широком диапазоне рабочих условий. Не имеет протеолитической активности. Выделена из штамма Escherichia coli, экспрессирующего ген нуклеазы из микроорганизма Serratia marcescens. Условия проведения реакции: 20 - 37°С, оптимальный буфер: 50 мM Трис-HCl (рН 8,0 при 25°С); 100 -150 мM NaCl; 1 мМ MgCl2.

Набор предназначен для очистки фрагментов двухцепочечной ДНК из агарозного геля и ферментативных реакционных смесей (ПЦР, рестрикция, лигирование и т.д.). Очищенная ДНК пригодна для ПЦР, секвенирования, рестрикции, лигирования, трансформации, трансфекции и других молекулярно-биологических приложений.

Описание: Мы предлагаем 10хSE-буферы, оптимизированные для работы с нашими ферментами. 10хSE-буферы обеспечивают оптимальные реакционные условия для достижения 100% активности, производимых нами ферментов (эндонуклеаз рестриции). Каждый фермент поставляется в комплекте с рекомендованным 10хSE-буфером. Некоторые ферменты требуют специфические реакционные условия, поэтому для них созданы индивидуальные кратные SE-буферы. Также некоторым эндонуклеазам рестриции для достижения 100% активности дополнительно требуется бычий сывороточный альбумин (BSA) или S-аденозил-L-метионин (SAM). Когда это необходимо, данные реактивы поставляются в комплекте с ферментом и 10хSE-буфером. Состав: 1X(10 mM Tris-HCl (pH 8.5 при 25°C); 5 mM MgCl2; 1 mM DTT.) Условия хранения: Хранить при -20°C С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер.

Ненуклеозидный фосфорамидит, предназначенный для введения в олигонуклеотиды остатка биотина по 5’-положению. Бесцветная твердая пена. Хорошо растворим в ацетонитриле и хлористом метилене.

Di-8-ANEPPS представляет собой потенциал-чувствительный краситель семейства амино-нафтил-этенил-пиридиния (Amino-Naphthyl-Ethenyl-Pyridinium, ANEP), который широко используется в качестве быстрореагирующего индикатора мембранного потенциала. Краситель не флуоресцирует в несвязанном с мембранами состоянии и отвечает только на колебания электрического потенциала в окружающей его среде. Скорость оптического ответа Di-8-ANEPPS достаточна для обнаружения миллисекундных колебаний мембранного потенциала в возбудимых клетках, таких как отдельные нейроны и клетки сердца, а также для имиджинга интактного мозга. Величина потенциал-зависимого изменения флуоресценции красителя составляет около 2-10% на 100 мВ. Краситель также демонстрирует потенциал-зависимый сдвиг в спектре возбуждения, что позволяет количественно оценивать колебания мембранного потенциала с использованием ратиометрических подходов. Di-8-ANEPPS обладает более липофильными свойствами и лучше удерживается внешним слое клеточной мембраны, чем другие красители семейства ANEP, что делает его идеально подходящим для долгосрочных экспериментов. Поскольку Di-8-ANEPPS связывается с клеточной мембраной, он может быть также использован в качестве простого маркера плазматических мембран. Максимумы возбуждения/эмиссии Di-8-ANEPPS в метаноле составляют 498/713 нм соответственно. В липидах и клеточных мембранах спектры возбуждения и излучения красителя обычно смещены в синий цвет по сравнению с органическими растворителями. Di-8-ANEPPS можно вводить в клетки прямым добавлением стокового раствора в культуральную среду, с использованием мягкого детергента Pluronic® F-127 или методом ретроградного мечения. В качестве отправной точки используйте рабочую концентрацию 5-10 мкМ. Точную концентрацию красителя следует определять экспериментально.

Дезоксиинозин - минорное основание, встречающееся в составе природных нуклеиновых кислот. Оно образует пары с основаниями A, C и T/U. Модифицированные ДНК-олигонуклеотиды, содержащие остаток инозина, можно синтезировать с помощью этого фосфорамидита.

Тест-система для выявления ДНК генетически модифицированной сои в продуктах питания и кормах для животных методом ПЦР.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: CCNGG ↑CCNGG GGNCC GGNCC↓ Источник: Bacillus stearothermophilus SC Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (dcm-) за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда (dcm-) Оптимальный буфер: SE-буфер Y Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 50 50 50 50 100 60 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 3 ед фермента в течение 16 часов при 55°С . Чувствительность к метилированию: Блокируется при перекрывании dcm- метилированием: (CmCWGG) CCWGG. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y. Примечание: При 37°С активность 10% от максимальной.

Состав: смесь для гидролиза ДНК эндонуклеазами рестрикции. Используется для предварительного выщепления амплифицируемого фрагмента ДНК при ПЦР как описано в публикации. Для заказа требуется указание эндонуклеазы рестрикции, подобранной таким образом, чтобы амплифицируемый фрагмент не расщеплялся.

Набор Quick-TA предназначен для быстрого клонирования продуктов ПЦР без предварительной обработки рестриктазами или экзонуклеазами.

TR — сульфо-аналог красителя ROX. Обладает схожими фотофизическими свойствами, эмиссия находится в красной области спектра. TR X это краситель с дополнительным спейсером на основе аминогексановой кислоты, который отдаляет флуорофор от биомолекулы и тем самым способствует снижению нежелательных взаимодействий. NHS эфир — производное для мечения первичных и вторичных аминогрупп, присутствующих в большинстве белков, пептидов и других молекул биологического происхождения.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: CCNNNNNNNGG CCNNNNN↑NNGG GGNNNNNNNCC GGNN↓NNNNNCC Источник: Bacillus schlegelii 4 Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер W Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 75 75 50 100 25 90 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C. Лигирование: После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 55°C. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер W, BSA Примечание: Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.