Поиск

Источник: Из Tritirachium album Описание: Катализирует неспецифический гидролиз белков Определение единицы активности: Активность >30.0 ед/мг Активность ДНКаз и РНКаз не выявлена Условия хранения: Хранить при -20°С Перед тем, как открыть упаковку, нагрейте ее до комнатной температуры Фасовка: 100 мг.

Описание: Мы предлагаем 10хSE-буферы, оптимизированные для работы с нашими ферментами. 10хSE-буферы обеспечивают оптимальные реакционные условия для достижения 100% активности, производимых нами ферментов (эндонуклеаз рестриции). Каждый фермент поставляется в комплекте с рекомендованным 10хSE-буфером. Некоторые ферменты требуют специфические реакционные условия, поэтому для них созданы индивидуальные кратные SE-буферы. Также некоторым эндонуклеазам рестриции для достижения 100% активности дополнительно требуется бычий сывороточный альбумин (BSA) или S-аденозил-L-метионин (SAM). Когда это необходимо, данные реактивы поставляются в комплекте с ферментом и 10хSE-буфером. Состав: 1X(50 mM Tris-HCl (pH 7.5 при 25°C); 6 mM MgCl2; 2 mM спермидин; 10 mM DTT.) Условия хранения: Хранить при -20°C. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер.

Описание: Представляет собой смесь специальных плазмид гидролизованных определенными ферментами с образованием 11 фрагментов пригодных для использования в качестве стандарта молекулярных весов в агарозном гель-электрофорезе. Длины фрагментов Длина фрагмента, п.н. Масса ДНК, нг Длина фрагмента, п.н. Масса ДНК, нг 1000 160 400 70 900 140 300 50 800 120 200 30 700 110 100 30 600 100 50 20 500 170 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 8.0); 1 mM EDTA; 50mM NaCl. Хранить при – 20°С. Примечание: ДНК маркер не предназначен для определения количества ДНК, однако может быть использован для приблизительной оценки путем сравнения интенсивности фрагментов одинакового размера. Мы рекомендуем наносить 0,5-1 мкг ДНК маркера на дорожку. Перед использованием в ДНК маркер добавить1/10 объема SE-буфера для нанесения с красителем. Маркер с красителем может храниться при 4-8°С в течение 6 месяцев.

Описание: Мы предлагаем 10хSE-буферы, оптимизированные для работы с нашими ферментами. 10хSE-буферы обеспечивают оптимальные реакционные условия для достижения 100% активности, производимых нами ферментов (эндонуклеаз рестриции). Каждый фермент поставляется в комплекте с рекомендованным 10хSE-буфером. Некоторые ферменты требуют специфические реакционные условия, поэтому для них созданы индивидуальные кратные SE-буферы. Также некоторым эндонуклеазам рестриции для достижения 100% активности дополнительно требуется бычий сывороточный альбумин (BSA) или S-аденозил-L-метионин (SAM). Когда это необходимо, данные реактивы поставляются в комплекте с ферментом и 10хSE-буфером. Состав: 1X(33 mM Tris-ацетат (pH 7.9 при 25°C); 10 mM магний-ацетат; 66 mM калий-ацетат; 1 mM DTT; 100 μg/ml BSA.) Условия хранения: Хранить при -20°C. Допускается хранение буфера при 4-10°C в течение 3 месяцев. Примечание: Буфер поставляется в концентрации 10Х. В нем присутствует концентрированный BSA, поэтому этот буфер требует бережной разморозки. Мы рекомендуем размораживать SE-буфер Y+ (10Х) при комнатной температуре и аккуратно перемешать его перед использованием. В случае нагревания концентрированного буфера до температуры, превышающей 37°C, может образовываться осадок вследствие частичной денатурации BSA.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: ATCGAT AT↑CGAT TAGCTA TAGC↓TA Источник: Bacillus stearothermophilus 29 Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (dam-) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда (dam-) Оптимальный буфер: SE-буфер G Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 25 100 50 50 75 100 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 250 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: Блокируется при перекрывании dam-метилированием (GmATC): GATCGATC. Блокируется CG метилированием. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер G, BSA (кроме E205T и E206T). Для фасовок Turbo (E205T и E206T) прикладывается только буфер ROSE. Примечание: Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.

Условия хранения: Хранить при -20°C Последовательность: CACAATTCCACACAAC Примечание: Поставляются в сухом виде.

Условия хранения: Хранить при -20°C Последовательность: GACTCCTGGAGCCCG Примечание: Поставляются в сухом виде.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: GCANNNNNTGC GCANNNN↑NTGC CGTNNNNNACG CGTN↓NNNNACG Источник: Bacillus stearothermophilus AP Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 60°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер W Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 25 25 75 100 25 100 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl(pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°C. Лигирование: После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 60°C. Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер W Примечание: Большой избыток фермента (более 5 ед на 1 мкг ДНК более 16 часов) приводит к появлению звездчатой активностиАктивность при 37°С 50% от максимальной.

Применение: Набор предназначен для выделения геномной ДНК из лёгкой фракции клеток крови. Набор рассчитан на 50 выделений Состав (в варианте 1.3): Раствор №1 (Лизирующий) – 2 х 45 мл. Раствор №2 (Солевой) – 1 х 36 мл. Раствор №3 (Осаждающий) – 2 х 48 мл. Раствор №4 (Для элюции и хранения) – 1 х 30 мл. Раствор №5 (Для подготовки спин-колонки) – 1 х 32 мл. Раствор №6 (Для уравновешивания) – 2 х 32 мл. Раствор №7 (Для подготовки образца) – 1 х 43 мл. Раствор №8 (Промывочный) – 3 х 40 мл. Спин-колонки (только для K008S) – 50 шт. Условия хранения: Набор хранить при комнатной температуре (20-25°C). Растворы №2, 4 и 5 после вскрытия хранить в холодильнике при +4 – +8°C Для работы потребуются: – вакутейнеры для забора крови на 9 мл (EDTA K2 или EDTA K3); – физиологический раствор аптечный стерильный комнатной температуры; – 70% этанол; – вода очищенная, стерильная; – центрифуга типа ELMI CM-6MT (Латвия), ротор 6M или 6M.02; – набор автоматических пипеток и наконечники к ним; – пробирки с крышками пластиковые мерные на 15 мл; – микропробирки с крышками пластиковые типа Eppendorf на 1,5 и 2 мл; – штативы для пробирок; – спин-колонки; – центрифуга для микропробирок на 1,5-2 мл (типа MiniSpin, Eppendorf, 13,000 об/мин); – термостаты на 55 и 65°С; – морозильная камера на -20°С.

Источник: Выделена из штамма E.coli XL1-Blue несущего системы метилирования Dam, Dcm Описание: Плазмида широко используется в качестве вектора для клонирования в E.coli, представляет собой кольцевую двухцепочечную молекулу ДНК длиной 2686 пар оснований. pUC19 несет полилинкер длиной 54 пары оснований и состоящий из сайтов 13ти рестриктаз узнающих гексануклеотидные палиндромные последовательности. Молекулярный вес – 1.75х106 дальтон Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.8); 1 mM EDTA. Хранить при – 20°С.

Описание: Представляет собой плазмиду pUC19 гидролизованную ферментом Msp I с образованием 12 фрагментов пригодных для использования в качестве стандарта молекулярных весов в агарозном и полиакриламидном гель-электрофорезе. Длины фрагментов Длина фрагмента, п.н. Длина фрагмента, п.н. Длина фрагмента, п.н. Длина фрагмента, п.н. 501 331 147 67 489 242 111 34 404 190 110 26 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.8); 1 mM EDTA; 50 mM NaCl. Хранить при – 20°С. Примечание: Рекомендуется наносить 1 мкг ДНК маркера на 1 дорожку. Перед использованием в ДНК маркер добавить1/10 объема SE-буфера для нанесения с красителем. Маркер с красителем может храниться при 4-8°С в течение 6 месяцев.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: CCGG C↑CGG GGCC GGC↓C Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген HpaII из Haemophilus parainfluenzae Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер B Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 50 10 25 50 50 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B. Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.