Genta-ExoI exonucléase I hydrolyse l'ADN simple brin dans la direction 3 '→ 5', libérant le désoxyribonucléoside 5'-monophosphate. Elle ne clive pas les brins d'ADN dont l'extrémité 3’est bloquée par le groupe phosphoryle ou acétyle. Elle est active dans le tampon PCR.
Elle est extraite de la souche Escherichia coli exprimant le gène de l'exonucléase I E. coli.