UltraFast Bst ДНК-полимераза

Описание фермента. InnovaHeliх использует энергию гидролиза нуклеотидтрифосфатов (АТФ, ГТФ) для движения вдоль сахарофосфатного остова нуклеиновых кислот (ДНК, РНК, гибридов ДНК/РНК) и разрыва внутри- или межмолекулярных водородных связей между основаниями, обладает способностью расплетать двухцепочечные ДНК-субстраты. Подходит для использования в составе смесей для LAMP (петлевая изотермическая амплификация) и ОТ-LAMP (петлевая изотермическая амплификация с обратной транскрипцией) в качестве дополнительного фермента, повышает специфичность изотермической реакции. Применение: полимеразная цепная реакция; полимеразная цепная реакция с этапом обратной транскрипции; петлевая изотермическая амплификация; одношаговая петлевая изотермическая амплификация с этапом обратной транскрипции (OT-LAMP); секвенирование. Происхождение фермента. Фермент получен из рекомбинантного штамма Еscherichia coli. Особенности фермента: термостабильность до 65 °С. Условия реакции: в 1-кратном реакционном буфере для изотермической амплификации, обогащенном АТФ и ГТФ. Инкубирование при температуре плюс 60-65 °C. Инактивация проходит при температуре плюс 85 °С в течение 5 мин. Буфер для хранения: 10 мМ Трис рН 7,5, 0,1 М KCl, 0,001 ДТТ, 0,1 мМ ЭДТА. Условия хранения: 1 год при температуре минус 20 °С. Цена указана за 1 мкг фермента при концентрации 20 мкг/мл.

Применение: синтез комплементарной цепи ДНК на матрице РНК (РНК зависимая ДНК полимераза); полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР); одношаговая петлевая изотермическая амплификация с этапом обратной транскрипции (OT-LAMP); секвенирование; синтез фрагментов кДНК длиной до 7000 п.о. Активность/единица активности: 40 ед.акт./мкл. Происхождение фермента. Фермент получен из рекомбинантного штамма Еscherichia coli, экспрессирующего модифицированный ген M-MuLV ревертазы. Особенности фермента: отсутствие активности РНКазы H; термостабильность до 62 ⁰С; высокий выход кДНК. Фермент активен в широком диапазоне температур от плюс 37 °С до плюс 62 °C. Условия реакции: в 1-кратном реакционном буфере; инкубирование при температуре от плюс 37 °C до плюс 62 °C в течение 15 – 60 минут. Инактивация проходит при плюс 85 °С в течение 5 минут. Буфер для хранения: 10 мМ Трис рН 7,5, 0,1 М KCl, 0,001 мДТТ, 0,1 мМ ЭДТА. Условия хранения: 1 год при температуре минус 20 °С. Используется в зарегистрированных в Минздраве РФ наборах реагентов для выявления РНК коронавируса SARS-CoV-2. Цена указана за 40 000 ед. акт. фермента. Поставляется с 5-кратным реакционным буфером.

Наименование показателя Норма Внешний вид Бесцветные кристаллы Температура плавления, °C 117-122 Потери при высушивании, %, не более 0.3 Массовая доля основного вещества в пересчете на абсолютно сухое вещество, % 99-101 (реакция с нитратом серебра). Содержание железа (Fe), не более 5 ppm Пропускание(1 см/6 M в воде ВЭЖХ класса) при 280 нм, не более 0.6 Пропускание(1 см/6 M в воде ВЭЖХ класса) при 300 нм, не более 0.1 pH (1 M) 4.7 – 7.0 ДНКазы и РНКазы, Не обнаруживаются.

 Преимущества набора: • ДНК из любых реакционных смесей, фрагменты длины от 70 до 20000 п. о. • Показатели А260/280 = 1,80±0,05, А260/230 ≥ 2,0 • Выделенный ПЦР-продукт пригоден для проведения лигирования, рестрикции, трансформации, секвенирования, ПЦР.

Продукт представляет собой стерильный 100 мМ раствор аналога кэпа m7GmAmG в виде аммонийной соли в воде. Продукт протестирован на присутствие эндо- и экзонуклеазной активности и свободен от примесей ДНКаз и РНКаз. Чистота нуклеотида по данным ВЭЖХ не менее 96%. Функциональная активность подтверждена in vitro в реакции транскрипции.

Сотрудниками компании СИНТОЛ разработан полимер "ПДМА-6" для секвенирования ДНК методом капиллярного электрофореза - линейный поли-N,N-диметилакриламид. По эффективности разделения полимер аналогичен полимеру "POP-7" производства фирмы "Applied Biosystems".

Продукт представляет собой стерильный 10 мМ раствор аналога структуры кэпа ARCA в виде аммонийной соли в воде. Продукт протестирован на присутствие эндо- и экзонуклеазной активности и свободен от примесей ДНКаз и РНКаз. Чистота нуклеотида по данным ВЭЖХ не менее 96%. Функциональная активность подтверждена in vitro в реакции транскрипции.

5Х Genta Taq-AB qPCR мастер-микс – готовая к использованию смесь для проведения качественной или количественной ПЦР с возможностью детекции результатов в режиме реального времени. 5Х Genta Taq-AB qPCR мастер-микс содержит все необходимые для проведения ПЦР компоненты, включая полимеразу Genta Taq-AB, дНТФ, Mg2+, краситель SYBR Green I и реакционный буфер. Для постановки реакции ПЦР в реакционную смесь необходимо добавить только олигонуклеотиды, матрицу и воду. Инактивация полимеразы Genta Taq-AB помощью антител позволяет проводить подготовку смесей при комнатной температуре. «Горячий» старт обеспечивает повышение специфичности амплификации. Диссоциация комплекса и высвобождение Genta Taq-AB ДНК-полимеразы обеспечивается прогреванием выше 70°C.

Фьюжн ДНК-полимераза является рекомбинантным полипептидом, состоящим из слитых термостабильной ДНК-полимеразы Pyrococcus furiosus (Pfu) и ДНК- связывающего белка термофильных архей вида Sulfolobus solfataricus (Sso7d). Белок Sso7d связывается с малой бороздкой двухцепочечной ДНК и дополнительно стабилизирует комплекс полимеразы с матрицей. Благодаря этому Фьюжн ДНК-полимераза, обладает повышенной процессивностью, точностью синтеза, скоростью амплификации фрагментов и повышенной устойчивостью к ингибиторам ПЦР по сравнению с нативной Pfu ДНК- полимеразой [1]. Фьюжн ДНК-полимераза обладает 5’→3’ полимеразной активностью, 3’→5’ экзонуклеазной активностью и синтезирует продукты с тупыми концами. Фьюжн ДНК-полимераза является хорошим выбором для рутинного клонирования и может использоваться для получения методом ПЦР длинных или сложных ампликонов. Примеры использования Фьюжн ДНК-полимеразы представлены в конце описания. Фьюжн ДНК-полимераза выделена из штамма E.coli, содержащего плазмиду с клонированным фрагментом ДНК, состоящим из слитых генов термостабильной ДНК-полимеразы Pyrococcus furiosus (Pfu) и ДНК-связывающего белка Sulfolobus solfataricus (Sso7d). Одна единица активности соответствует количеству фермента, необходимому для включения 10 нмолей dNTP в кислотонерастворимую фракцию ДНК за 30 мин при 74°С.

Набор предназначен для выделения и очистки ДНК из следующих образцов: 1. Листья, хвоя, тычинки, зелёные части растений 2. Корни, стебли, кора 3. Плоды, ягоды, семена 4. Мхи, лишайники 5. Одноклеточные водоросли

Набор реагентов «ALVETPREP» предназначен для одновременного выделения ДНК и РНК из биологического материала для последующего анализа получаемого препарата ДНК/РНК с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) и полимеразной цепной реакции с этапом обратной транскрипции (ОТ-ПЦР). Профессиональное применение в научно-исследовательских целях, в специализированных лабораториях санитарной экспертизы и пищевой промышленности.

На­­бор реа­­­ген­­­тов «ALPREP Ampli Magnetic» пред­­наз­­на­­чен для очист­ки ДНК из ре­ак­ци­он­ных сме­сей по­сле ПЦР, ли­ги­ро­ва­ния, ре­стрик­ции ме­то­дом маг­нит­ной сорб­ции. На­бор ре­а­ген­тов раз­ра­бо­тан для при­ме­не­ния в на­уч­но-ис­сле­до­ва­тельских це­лях. Очи­­щен­­ная ДНК при­­год­на для по­­сле­­дую­­ще­­го ис­­поль­­зо­­ва­­ния в ПЦР, ПЦР-РВ, рест­­рик­­ции, ли­­ги­­ро­­ва­­нии, про­­бо­­под­­го­­тов­ки для се­к­ве­ни­ро­­ва­­ния ме­­то­­да­ми Сэн­ге­ра и NGS, а так­­же в иных ген­­но-ин­­же­­нер­­ных при­­ло­­же­ни­ях. Прин­цип ра­бо­ты на­бо­ра реа­ген­тов «AL­PREP Amp­li Mag­ne­tic» зак­лю­чает­ся в об­ра­ти­мом свя­зы­ва­нии мо­ле­кул нук­леи­но­вых кис­лот на по­верх­ности час­тиц маг­нит­но­го сор­бента пос­ле об­ра­бот­ки ис­поль­зуе­мо­го образ­ца ком­по­нен­та­ми на­бо­ра. Характеристики: - Очистка одно- и двух­це­по­чеч­ной ДНК из ре­ак­цион­ных сме­сей. - Эффективная очистка ДНК от несвязанных dNTPs, со­лей и дру­гих при­ме­сей. - Очистка от фрагментов до 100 п.о. (в т.ч. прай­ме­ров и их ди­ме­ров). - Вы­ход фраг­мен­тов ДНК пос­ле очист­ки от 70%.

Набор реагентов «ALPREP Gel Magnetic» предназначен для выделения ДНК из агарозного геля методом магнитной сорбции. Подходит для работы с агарозными гелями на основе буферных растворов ТАЕ (Трис-Ацетат-ЭДТА) и ТБЕ (Трис-Борат-ЭДТА). Набор не содержит опасных летучих химических веществ, таких как хлороформ, бензол, фенол и пр.

Набор реагентов предназначен для выявления следовых количеств ДНК и РНК. Набор реагентов «CleanCheck DNA-RNA Free Plastic» применяется для: - проверки и проведения контроля качества пластиковых изделий в целях нанесения маркировки «DNA, RNA Free»; - выявления следовых количества ДНК и РНК при проведении контроля качества на любых видах поверхностях, в растворах и реагентах, на пластиковых расходных материалах и принадлежностях, на оборудовании, мебели и инструментарии - применимо для контроля реагентов и пластиковых расходных материалов для выявления следовых количеств человеческой ДНК и РНК.

Набор реагентов «CleanCheck DNAse-RNAse Free» предназначен для выявления загрязнений нуклеазами. Набор позволяет обнаружить самые низкие количества РНКазы и ДНКазы, деградирующие как одноцепочечные, так и двуцепочечные ДНК. Применим для проведения контроля пластиковых изделий, а также для выявления загрязнений нуклеазами в ПЦР-лабораториях на любых видах поверхностях, в растворах, реагентах (не являющихся ингибиторами ПЦР), на пластиковых расходных материалах и т.д. Преимущества: - Возможность определения ДНКаз/РНКаз на различных поверхностях, одежде, оборудовании и реагентах. - Выявление локализации загрязнения нуклеазами. - Время проведения анализа: 1,5 часа. Простая пробоподготовка без этапа экстракции, время ручных манипуляций: 10 – 15 минут. - Нет необходимости в приобретении нового оборудования. - Чувствительность выявления следовых загрязнений: РНКаза A: 0.1 pg/μl; ДНКаза I: 1 x 10–5 units/μl.

Вода «ALSENSE Water for PCR» ‒ реагент, предназначенный для разведения реактивов при проведении анализа методом ПЦР, подготовки отрицательных контролей и испытуемых образцов. Область применения: За счёт отсутствия нуклеаз и нуклеиновых кислот вода применяется при проведении молекулярно-биологических и иных исследований в лабораторной практике, а также при производстве ПЦР-наборов и тест-систем.