Биореактивы

Бифункциональный линкер, содержащий азодибензоциклооктин (ДБЦО, или АДИБО) для реакций безмедной клик-химии и аминогруппу для конъюгации с активированными производными карбоновых кислот и эпоксидами. Дибензоциклооктин (ДБЦО) — один из самых реакционноспособных циклоалкинов для реакций безмедной клик-химии (SPAAC, СПААЦ, стерически промотируемого алкин-азидного циклоприсоединения). ДБЦО моментально реагирует с азидами, при этом скорость процесса значительно выше, чем у медь-катализируемой клик-реакции, и реакций циклоприсоединения с другими циклооктинами. В отличие от некоторых циклооктинов, ДБЦО не вступает во взаимодействие с тетразинами.

Дибензоциклооктин (ДБЦО, DBCO, ADIBO) - один из самых реакционноспособных циклоалкинов для реакций безмедной клик-химии (т.н. SPAAC, стерически промотируемого алкин-азидного циклоприсоединения). Скорость взаимодействия ДБЦО с азидами значительно выше, чем у других циклооктинов, а также Cu-катализируемой клик-реакции (CuAAC). В отличие от других циклооктинов, DBCO не вступает во взаимодействие с тетразинами, что позволят использовать его в биоортогональных реакциях совместно с транс-циклооктенами и тетразинами. AF 488 - сульфированный родамин, яркий, фотостабильный и гидрофильный флуорофор, излучающий в зеленом канале. Максимум поглощения - 495 нм. Максимум эмиссии - 519 нм. AF 488 ДБЦО позволяет проводить флуоресцентное мечение азид-содержащих биомолекул внутри живых клеток, целых организмов и неживых образцах.

Водорастворимый краситель ближнего ИК-диапазона в виде азида, пригодного для использования в реакции азид-алкильного циклоприсоединения. sulfo-Cyanine7 - цианиновый краситель, аналог Cy7® с улучшенными фотофизическими свойствами. Этот краситель прекрасно подходит для неинвазивной ИК-визуализации распределения меченых биомолекул in vivo.

В состав набора входят смеси олигонуклеотидных адаптерных праймеров, позволяющие выполнить быструю амплификацию 5’- и 3’-концевых фрагментов целевых транскриптов (Rapide Amplification of cDNA Ends – RACE) с кДНК-матрицы, приготовленной с помощью набора для синтеза кДНК Mint и обогащенной полноразмерными последовательностями. Для выявления 5’- и 3’-концевых последовательностей используется технология Step-Out RACE. В настоящий момент этот метод является самым быстрым и надежным способом получить данные о структуре полноразмерного транскрипта, основываясь на минимальной информации о его последовательности (30-50 нуклеотидов). Технология Step-Out RACE не включает технологически сложного процесса лигирования адаптеров и заменяет трудоемкую процедуру клонирования и скрининга полноразмерной библиотеки кДНК. В набор входят геноспецифические праймеры, позволяющие выполнить контрольную амплификацию 5’- и 3’-концевых фрагментов кДНК гена G3PDH мыши на контрольной матрице.

SNPdetect — термостабильная высокоточная ДНК-полимераза с «горячим стартом», лишена экзонуклеазной активности. SNPdetect используется для детекции однонуклеотидных полиморфизмов (SNP) и специфичной амплификации фрагментов ДНК длиной до 1 000 п.о. Область применения: • SNP генотипирование: аллель-специфичная ПЦР (AS-PCR), аллель-специфичное удлинение праймера (AS-PEX). • Высокоспецифичная ПЦР, в том числе мультиплексная ПЦР. • ПЦР-РВ с изменением конформации зондов без его разрушения, например, технологии Scorpion, Amplifluor, LUX и др. • HRM, плавление с использованием меченных и немеченных зондов. • ПЦР-РВ с интеркалирующими красителями.

Тест-система для количественного определения фрагментов ДНК, широко встречающихся у генетически модифицированных линий сои.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: TTSAA TTS↑AA AASTT AA↓STT Источник: Agrococcus species 25 Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага Лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага Лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер Y Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 75 50 10 10 100 50 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl(pH 7.5); 100 mM KCl; 0,1 mM EDTA; 200 μg/ml BSA, 7 mM2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: Блокируется метилированием: 5`-TTSA(m6A)-3`/ 3`-(m6A)ASTT-5`. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y, BSA Примечание: BSA при длительной инкубации использоватьне рекомендуется. Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: AACGTT AA↑CGTT TTGCAA TTGC↓AA Источник: Acinetobacter calcoaceticus Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер Y Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 80 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 0.05% Triton X-100; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 2-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y, BSA Примечание: Для достижения 100% активности следует добавлять BSA в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл. BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.

Описание: Мы предлагаем 10хSE-буферы, оптимизированные для работы с нашими ферментами. 10хSE-буферы обеспечивают оптимальные реакционные условия для достижения 100% активности, производимых нами ферментов (эндонуклеаз рестриции). Каждый фермент поставляется в комплекте с рекомендованным 10хSE-буфером. Некоторые ферменты требуют специфические реакционные условия, поэтому для них созданы индивидуальные кратные SE-буферы. Также некоторым эндонуклеазам рестриции для достижения 100% активности дополнительно требуется бычий сывороточный альбумин (BSA) или S-аденозил-L-метионин (SAM). Когда это необходимо, данные реактивы поставляются в комплекте с ферментом и 10хSE-буфером. Состав: 1X(20 mM Tris-HCl (pH 8.5 при 25°C); 10 mM MgCl2; 200 mM NaCl; 1 mM DTT.) Условия хранения: Хранить при -20°C С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер.

LumiTracker® Lyso Blue — флуоресцентный краситель, избирательно накапливающийся в клеточных органеллах с кислым содержимым. Он активно используется для окрашивания живых лизосом, поддерживающих для эффективной работы гидролитических ферментов низкий уровень pH с помощью протонной помпы. LumiTracker® Lyso Blue содержит в своей структуре аминогруппы, которые выступают в роли слабого основания. В нейтральной среде они не полностью протонированы, и молекула красителя остается относительно нейтральной, что способствует лучшему ее проникновению через клеточную мембрану. Попадая в лизосомы и другие органеллы с кислой средой, краситель протонируется и, предположительно, таким образом удерживается в их составе. Мечение живых клеток производится с использованием наномолярных концентраций LumiTracker® Lyso Blue без использования детергентов. Протонирование красителя способствует локальному защелачиванию, поэтому окрашивание живых клеток рекомендуется проводить не более 7 мин непосредственно перед визуализацией с помощью флуоресцентной микроскопии. LumiTracker® Lyso Blue имеет максимум поглощения при 373 нм и максимум флуоресценции при 422 нм. Для визуализации лизосом мы также предлагаем LumiTracker® Lyso Green и LumiTracker® Lyso Red для зеленого и красного каналов. LumiTracker® Lyso Blue поставляется в виде 1 mM раствора в ДМСО.

Источник: Выделен из штамма E.coli, содержащего ген ДНК-полимеразы (Фрагмент Кленова) Описание: Продукт протеолиза ДНК Полимеразы I (E.coli), у которого сохраняется полимеразная и экзонуклеазная активность в направлении 3`->5`, но отсутствует экзонуклеазная активность в направлении 5`->3`. Определение единицы активности: За одну единицу активности принимали количество фермента, необходимое для перевода 10 нмолей dNTP в кислотонерастворимую фракцию за 30 мин при 37°С. Оптимальный буфер: SE-буфер Фрагмент Кленова Условия хранения: 10 mM KH2PO4(pH 7.5); 50 mM KCl; 0.5 mM EDTA; 10 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°C.

Набор предназначен для быстрого выделения плазмидной ДНК высокой степени очистки из культуры клеток E. coli. Выделенная ДНК пригодна для ПЦР, секвенирования, рестрикции, трансформации, трансфекции и других молекулярно-биологических приложений.