Биореактивы

Taq ДНК-полимераза предназначена для рутинных аналитических исследований. Taq ДНК-полимераза получена из штамма E.coli, экспрессирующего ген polA термостабильной бактерии Thermus aquaticus YT1. Область применения • Амплификация ДНК. • ПЦР-РВ с TaqMan-зондами. • ПЦР-РВ с интеркалирующими красителями. • ПЦР-скрининг

Сайт узнавания и позиция гидролиза: CCCGGG CCC↑GGG GGGCCC GGG↓CCC Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Sma I из Serratia marcescens Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (HindIII-digest) за 1 час при 25°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда (HindIII-digest) Оптимальный буфер: SE-буфер Y Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 50 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 μg/ml BSA; 1 mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 20-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК сшиваются высокоактивной T4 ДНК-лигазой в присутствии 10% ПЭГ и могут быть повторно расщеплены. В присутствии 10% ПЭГ сшивка более эффективна. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 25°С. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y. Для фасовок Turbo (E177T и E178T) прикладывается буфер 10x SE-Буфер Y. Turbo Sma I можно использовать как для быстрого гидролиза ДНК (в течение 15 мин), так и в стандартной реакции гидролиза в течение 1 ч. Применение Turbo эндонуклеаз рестрикции: – быстрый гидролиз (анализ) ДНК – быстрое приготовление векторов для клонирования – гидролиз ДНК двумя разными ферментами Свойства Turbo фермента: С помощью 1 мкл эндонуклеазы рестрикции Turbo Sma I можно расщепить до 1 мкг двуцепочечной ДНКв 1x SE-Буфере Y в течение 15 мин (см. протокол ниже). Препарат ДНК, используемый в реакции быстрого гидролиза Turbo ферментом, должен быть высокой степени очистки. Данный Turbo фермент можно применять и в стандартной реакции гидролиза ДНК (в течение 1-16 ч). Стандартный протокол Turbo реакции: На 20 мкл реакционной смеси: Y (x10) – 2 мкл ДНК – 0,2-1 мкг Дист. вода – до 20 мкл + 1мкл препарата Turbo Sma I эндонуклеазы рестрикции. Инкубировать при 25°C в течение 15 мин.

Спецификация Наименование показателя Норма Внешний вид Бесцветная жидкость Чистота по ГЖХ ≥ 99,70% Содержание воды по Фишеру, ppm ≤ 30,0 Кислотность, мэкв/г ≤ 0,0010 Щёлочность, мэкв/г ≤ 0,0010 Отфильтрован 0,2 мкм. фильтром и закупорен в атмосфере аргона. Подходит для использования при синтезе ДНК и Пептидов.

Реакционная смесь 5X qPCRmix-HS SYBR+HighROX оптимизирована для постановки ПЦР с SYBR Green I в присутствии референсного красителя ROX, и позволяет получать результаты со значительным превышением уровня сигнала над фоновой флуоресценцией и низким порогом насыщения реакции (cycle threshold, Ct). В состав 5X qPCRmix-HS SYBR+HighROX входят все необходимые компоненты для ПЦР: HS Taq ДНК полимераза, интеркалирующий краситель SYBR Green I, референсный краситель ROX, смесь dNTP, Mg2+, ПЦР буфер. Для постановки ПЦР в смесь требуется добавить праймеры, ДНК и воду. 5X qPCRmix-HS SYBR+HighROX подходит для Real-Time амплификаторов, требующих высокой концентрации красителя ROX в реакции (например, StepOne, StepOne Plus).

LumiTracker ER Red (также известен как ER-Tracker™ Red) — проникающий в клетки высокоселективный краситель эндоплазматического ретикулума (ER) для визуализации живых клеток. LumiTracker ER Red представляет собой производное красного флуоресцентного красителя BDP TR, соединенного с глибенкламидом (глибуридом). Глибенкламид связывается с рецепторами сульфонилмочевины (SUR) АТФ-зависимых калиевых каналов (KATP), которые активно представлены в эндоплазматическом ретикулуме. Окрашивание в клетках частично сохраняется после их фиксации формальдегидом. LumiTracker ER Red не подходит для окрашивания клеток после фиксации. Фармакологическая активность глибенкламида потенциально может влиять на функцию эндоплазматического ретикулума. Вариабельная экспрессия рецепторов сульфонилмочевины в некоторых специализированных типах клеток может приводить к появлению неспецифического мечения.

SYBR Green I – интеркалирующий краситель, специфичный к двухцепочечной ДНК. Раствор SYBR Green I оптимизирован для применения в ПЦР с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ). Рекомендуется использовать как 50X раствор, при оптимизации условий ПЦР допускается двухкратное увеличение или двухкратное уменьшение (25Х – 100Х) концентрации красителя в реакционной смеси.

Иммуноглобулины IgG собаки (D Igg) выделены из сыворотки крови животного методом сульфатного осаждения, с последующей очисткой методом ион-обменной хроматографии. В препарате D Igg содержится около 95% иммуноглобулинов IgG собаки и незначительная примесь иммуноглобулинов IgA и иммуноглобулинов IgM (не более 2%).

Фибронектин - мультидоменный димерный гликопротеин с двумя идентичными субъединицами массой ~230-250 кДа ковалентно связанными возле С-конца парой дисульфидных связей. Существует две формы фибронектина: фибронектин плазмы крови и клеточный фибронектин. Плазменный фибронектин синтезируется в печени гепатоцитами и присутствует в растворенной форме в плазме крови человека в концентрации около 300 мкг/мл. Клеточный фибронектин секретируется фибробластами и другими типами клеток. Он организован в виде фибрилл и находится во внеклеточном матриксе. Во внеклеточном матриксе фибронектин обеспечивает адгезию и миграцию клеток.

Источник: Выделена из культуры клеток человека линии L-68 (эмбрион женского пола). Диплоидные клетки (фибробласты) из здоровой ткани легкого. Описание: Геномная ДНК из культуры клеток человека линии L-68. Клетки выращивались в питательной среде Игла – 90%, сыворотка крови плода коровы – 10%. Способ культивирования – монослойный. Геномная ДНК выделялась по стандартной методике. Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.8); 1 mM EDTA. Хранить при – 20°С. Контроль качества: Препарат ДНК не содержит примесей белков и РНК. Примечание: Следует избегать многократного замораживания-оттаивания.

Описание: Представляет собой ДНК фага Лямбда гидролизованную ферментом Hind III с образованием 8 фрагментов пригодных для использования в качестве стандарта молекулярных весов в агарозном гель-электрофорезе. Длины фрагментов Длина фрагмента, п.н. Длина фрагмента, п.н. Длина фрагмента, п.н. Длина фрагмента, п.н. 23130 6557 2322 564 9416 4361 2027 125 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.8); 1 mM EDTA. Хранить при – 20°С. Примечание: Рекомендуется наносить 1 мкг ДНК маркера на 1 дорожку. Перед использованием в ДНК маркер добавить1/10 объема SE-буфера для нанесения с красителем. Маркер с красителем может храниться при 4-8°С в течение 6 месяцев.

Водорастворимый краситель ближнего ИК-диапазона в виде азида, пригодного для использования в реакции азид-алкильного циклоприсоединения. sulfo-Cyanine7 - цианиновый краситель, аналог Cy7® с улучшенными фотофизическими свойствами. Этот краситель прекрасно подходит для неинвазивной ИК-визуализации распределения меченых биомолекул in vivo.