Биореактивы

Тест-система для выявления ДНК вируса африканской чумы свиней (African swine fever virus) методом ПЦР.

BDP R6G это краситель бордипиррометенового ряда. Благодаря наличию в своем в составе N-гидроксисукцинимидных (NHS) групп, способен к химическому присоединению к аминам. Его спектры абсорбции и эмиссии похожи на спектры красителя R6G. BDP R6G - яркий и фотостабильный краситель, с большим временем жизни флуоресценции, не показывающим сколь-нибудь заметной pH-зависимости. По причине относительно долгого времени жизни флуоресценции, краситель подходит для использования в экспериментах, связанных с анизотропией поляризации, и для двухфотонных экспериментов. N-cукцинимидная группа может вступать в конъюгацию с различными аминогруппами, присутствующими в белках и пептидах.

Родамин 123 (Rh123) — катионный зеленый флуоресцентный ксантеновый краситель, используемый для мониторинга поляризации мембран в митохондриях и бактериях в исследованиях на живых клетках. Краситель внутри митохондрий распределяется в соответствии с отрицательным потенциалом мембраны. Потеря потенциала приводит к уменьшению связывания красителя и, следовательно, снижению интенсивности флуоресценции. Как и TMRE, Родамин 123 может быть использован в качестве инструмента для изучения изменений функционирования митохондрий и жизнеспособности клеток в ответ на исследуемые агенты. Родамин 123 также используют в качестве индикаторного красителя для определения скорости и направления мембранного транспорта.

Данный набор предназначен для измерения концентрации двухцепочечной ДНК в широком диапазоне на флуориметре (подходит любая версия флуориметра). Набор включает в себя 200× концентрат флуоресцентного красителя QuDye dsDNA BR, буфер для приготовления рабочего раствора красителя и стандарты концентрации ДНК (0 и 100 нг/мкл). Краситель QuDye dsDNA BR обладает селективностью по отношению к двухцепочечной ДНК, поэтому на результаты измерения не влияют примеси РНК, нуклеотидов и белков. Другие примеси в незначительном количестве, такие как соли, детергенты и растворители, оказывают несущественное влияние на результаты измерений. Данный набор позволяет точно измерять концентрацию дцДНК в диапазоне от 100 пг/мкл до 1000 нг/мкл для исходного образца (диапазон количества ДНК для измерения на флуориметре: 2–1000 нг ДНК в 200 мкл образца для измерения). Основной компонент набора — флуоресцентный краситель QuDye dsDNA BR, селективно связывающий ДНК и проявляющий выраженную флуоресценцию в составе комплекса с молекулой ДНК. Использование данного набора является удобным способом квантификации дцДНК в широком диапазоне концентраций, он не требует большого объема исходного образца (1–20 мкл), все измерения проводятся при комнатной температуре и занимают, в среднем, 15-20 минут (в зависимости от количества образцов); флуоресценция образцов стабильна в течение 3 часов. Для проведения измерения необходимо приготовить рабочий раствор красителя, развести в нем в отдельных пробирках стандарты концентрации ДНК и экспериментальные образцы и провести измерения интенсивности флуоресценции на флуориметре. Для удобства мы предлагаем фасовки набора, включающие совместимые с флуориметром тонкостенные пробирки. Кроме этого, данный набор можно использовать в сочетании с набором QuDye Protein Quantification Kit для определения примеси белка в образце ДНК. Для количественного анализа образцов с меньшей концентрацией дцДНК воспользуйтесь набором QuDye dsDNA HS Assay Kit с диапазоном измеряемых концентраций 10 пг/мкл—100 нг/мкл для исходного образца.

LumiTracker Lyso Green — краситель, свободно проникающий через клеточные мембраны без использования дополнительных детергентов и концентрирующийся в органеллах с низким pH, например, лизосомах. В отличие от 2,4-динитрофенола (DNP), этот краситель не требует использования антител для визуализации органелл. В структуру молекулы LumiTracker Lyso Green входит бордипиррометен (BDP), что придает ей выраженные гидрофобные свойства и обеспечивает хорошую проникающую способность через мембрану клетки. Кроме этого, краситель содержит в своей структуре аминогруппу, которая выступает в роли слабого основания. В нейтральной среде она не полностью протонирована, и молекула красителя остается относительно нейтральной, что способствует лучшему проникновению через клеточную мембрану. Предположительно, попадая в лизосомы с кислой средой, краситель протонируется и таким образом удерживается в составе органеллы с низким pH. Мечение живых клеток проводится с использованием наномолярных концентраций LumiTracker Lyso Green, и окрашивание проходит в течение нескольких минут. LumiTracker Lyso Green может влиять на лизосомальный pH, так что более длительная инкубация может вызвать его повышение, поэтому окрашивание рекомендуется проводить в течение 3-7 минут при 37°C (в зависимости от клеточной линии и протокола окрашивания) перед визуализацией с использованием флуоресцентной микроскопии. LumiTracker Lyso Green имеет максимум поглощения при 504 нм и максимум флуоресценции при 511 нм. Для визуализации лизосом мы также предлагаем LumiTracker Lyso Red для красного канала (максимумы поглощения и флуоресценции при 577 нм и 590 нм, соответственно). LumiTracker Lyso Green поставляется в виде 1 mM раствора в ДМСО.

Модифицирующий носитель предназначен для синтеза олигонуклеотидов с тушителем DusQ 2 на 3’-конце. Размер пор носителя 1000 Å подходит для синтеза олигонуклеотидов длиной до 120 оснований. DusQ 2 — нефлуоресцирующий тушитель с поглощением в диапазоне 560–670 нм. Подходит для эффективного тушения по механизму FRET флуорофоров с эмиссией в указанном диапазоне. Кроме этого, тушитель используется в гибридизационных зондах на основе статического и смешанного тушения, при этом эффективность тушения в незначительной степени зависит от перекрытия спектров флуорофора и тушителя, что обеспечивает эффективное тушение широкого спектра флуорофоров, в том числе с эмиссией в красном и дальнем красном диапазонах. Таким образом, список флуорофоров для использования с DusQ 2 включает, но не ограничивается Cyanine3, TAMRA, ROX, Cyanine3.5, Cyanine5, Cyanine5.5.

Амино-FAM, аминопроизводное флуоресцеин, высокой изомерной чистоты (5-изомер). В отличие от флуорсцеинамина, этот реагента содержит линкер с алифатической аминогруппой, которая является более реакционноспособной. Может реагировать с электрофильными реагентами, такими как активированные эфиры или эпоксиды, вовлекается в ферментативное трансаминирование.

Готовый набор, содержащий все необходимые реагенты для мечения мембран клеток красителем PKH26 с целью последующей оценки клеточной миграции или пролиферации. В наборе используется цианиновый краситель PKH26. В его структуре есть липофильные группы, позволяющие быстро и нековалентно встраиваться в клеточные мембраны практически любых клеток, не влияя на клеточные рецепторы или трансмембранные белки. При этом клетки сохраняют свои биологические свойства и способность к пролиферации, что делает PKH26 отличным флуорофором для изучения как растительных, так и животных клеток in vivo и in vitro. Он также подходит для изучения мембранных везикул. PKH26 испускает свет в красной области спектра, с максимумом флуоресценции 567 нм, его можно использовать наряду с другими красителями в многоцветных исследованиях. PKH26 довольно стабилен, и меченные им клетки могут быть исследованы с использованием микроскопии или проточной цитометрии в течение 100 дней после окрашивания. Количество измерений, на которое рассчитан набор, может отличаться в зависимости от количества клеток в образце: Набор, содержащий 100 µL красителя PKH26, позволяет проанализировать 25 образцов по 20 миллионов клеток в каждом, при использовании финальной концентрации красителя PKH26 равной 2×10-6 M. Набор, содержащий 500 µL красителя PKH26, позволяет проанализировать 125 образцов по 20 миллионов клеток в каждом, при использовании финальной концентрации красителя PKH26 равной 2×10-6 M. Рекомендуется определить оптимальные количество клеток и концентрацию красителя исходя из типа (ов) клеток и экспериментальных задач.

HMRhoNox-M (также известный как LysoRhoNox) — Fe2+-селективный флуоресцентный индикатор, основанный на контролируемой N-оксидом спироциклизации тетраметил-гидроксиметилродамина. В отсутствие Fe2+ HMRhoNox-M находится в нефлуоресцентной спироциклической форме, демонстрируя лишь незначительную флуоресценцию в водных буферах и при физиологическом значении рН. Добавление Fe2+ вызывает 60-кратное увеличение флуоресценции при 575 нм за счет дезоксигенации диалкиламиногруппы и перехода индикатора в открытую флуоресцентную форму. HMRhoNox-M реагирует на Fe2+ дозозависимым образом. Флуоресцентный ответ HMRhoNox-M высокоизбирателен к Fe2+и не возникает на ионы других переходных металлов, включая Fe3+, а также ионы щелочных и щелочноземельных металлов. HMRhoNox-M — проникающий в клетки и локализующийся в основном в лизосомах индикатор. Он подходит для мониторинга изменений содержания эндогенного лабильного железа в живых клетках, в том числе захвата и транспорта железа трансферрином.

Окса-бис-(этиленнитрило)-тетраметиленфосфоновая кислота, или Оксабифор кислота — тетрафосфонатный лиганд, использующийся как хелатор для получения комплексов с металлами ряда лантаноидов. Оксабифор может использоваться для приготовления меченых препаратов в радиофармацевтических исследованиях и для терапевтической доставки радионуклидов [1].

Флуоресцентный конъюгат биотина, который может быть использован в флуоресцентных аналитических методиках и для визуализации меченных стрептавидином/авидином биомолекул, к которым биотин имеет высокую аффинность. Наличие у стрептавидина четырех центров связывания биотина благоприятствует разработке поэтапных методов анализа. Например, биотинилированную целевую молекулу, обладающую аффинностью к поверхности, можно иммобилизировать на ней. Обработка стрептавидином и отмывка приводит к иммобилизации стрептавидина, который, в свою очередь, можно визуализировать данным конъюгатом и детектировать с помощью флуоресцентной спектроскопии или микроскопии. Длинный и гидрофильный ПЭГ-линкер способствует эффективному связыванию и препятствует неспецифическим взаимодействиям.

AF 568 — синтетический флуорофор. Максимум возбуждения AF 568 соответствует 572 нм, максимум эмиссии — 598 нм. Краситель AF 568 может возбуждаться лазером с длиной волны 561 нм, его спектр находится в том же диапазоне, что и спектр техасского красного , TF4 (Tide Fluor™ 4) и sulfo-Cyanine3.5. Поскольку активированный эфир AF 568 обладает яркой и стабильной флуоресценцией и может быть конъюгирован с белками и пептидами, его можно использовать как средство визуализации, например, в вестерн-блоттинге, флуоресцентной микроскопии и проточной цитофлуориметрии.