Биореактивы

Флуоресцентный краситель флуоресцеин, содержащий азидную группу. Чистый 6-изомер. Предназначен для модификации с помощью click-реакций. Эмиссия в зеленой области спектра. Кристаллическое вещество от светло-желтого до оранжевого цвета. Хорошо растворим в диметилсульфоксиде, диметилформамиде и других полярных растворителях.

Источник: Выделена из штамма E.coli, содержащего клонированный ген полинуклеитидкиназы из бактериофага Т4 Описание: Катализирует перенос (и обмен) концевой фосфатной группы АТФ на 5`-гидроксильную группу ДНК (РНК). Определение единицы активности: За одну единицу активности Т4 полинуклеотидкиназы принимали количество фермента, необходимое для включения 1 нмоля [32P] в кислотонерастворимую фракцию за 30 мин при 37°С. Оптимальный буфер: SE-буфер полинуклеотидкиназа T4 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl;0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50% глицерин. Хранить при -20°С.

ROX-тетразин представляет собой производное красителя ROX (Rhodamine X, Rhodamine 101) — флуорофора красной области спектра, обладающего высокой яркостью и квантовым выходом флуоресценции. Это производное содержит фрагмент тетразина, способный реагировать с напряженными транс-циклоалкенами в реакции Дильса-Альдера с обращёнными электронными требованиями (IEDDA). Данная реакция отличается высокой скоростью и специфичностью. Данный реагент представляет собой высокоочищенный 5-изомер ROX.

Дуплекс-специфическая нуклеаза (ДСН) очищена из гепатопанкреаса камчатского краба с помощью модифицированного протокола. ДСН – термостабильная нуклеаза, обладающая специфичностью к двухцепочечной (дц) ДНК. ДСН проявляет гидролитическую активность в присутствии ионов двухвалентных металлов (например, Mg2+). ДСН может быть использована для удаления двухцепочечной ДНК из сложных смесей нуклеиновых кислот, например при нормализации образцов кДНК или при определении длины выступающих теломерных концов.

Буферы 10X Tersus Plus без Mg2+ предназначен для работы со смесью полимераз Tersus. Концентрация ионов магния в 10X Tersus Plus буфере составляет 25 мM. При использовании в рекомендованных разведениях каждый буфер обеспечивает 2,5 мM концентрацию ионов магния в ПЦР реакции. 10X Tersus Plus буфер (без Mg) предназначен для постановки реакций, требующих индивидуального подбора концентрации Mg;

Сайт узнавания и позиция гидролиза: ACGT A↑CGT TGCA TGC↓A Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген HpySE 526I из Helicobacter pylori SE526 Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК pUC19 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК pUC19 Оптимальный буфер: SE-буфер Y Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 75 75 10 25 100 50 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.6); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 1 mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: CGCG CG↑CG GCGC GC↓GC Источник: Bacillus species FN Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер Y Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 50 75 75 50 100 100 Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 7.5); 300 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°C. Лигирование: После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°C. Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.

Реакционная смесь 5X qPCRmix-HS SYBR предназначена для ПЦР в реальном времени с интеркалирующим красителем SYBR Green I. В состав 5X qPCRmix-HS SYBR входят все необходимые компоненты для ПЦР: высокопроцессивная Taq ДНК полимераза со специфическими моноклональными антителами, краситель SYBR Green I, смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов, Mg2+, ПЦР буфер. Для постановки реакции ПЦР в смесь требуется добавить праймеры, матрицу ДНК и воду. 5X qPCRmix-HS SYBR подходит для Real-Time амплификаторов любого типа.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: GTSAC ↑GTSAC CASTG CASTG↓ Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген TseFI из Thermus species F35 Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 65°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер B Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 50 25 50 50 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.6); 50 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 65°С. Чувствительность к метилированию: С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B.

Буфер для приготовления рабочих растворов мембранных красителей серии PKH. Буфер не требует предварительного разбавления и полностью готов к применению. Данный буфер для разведения входит в готовые наборы для мечения клеточных мембран красителями PKH26, PKH2 и PKH800. Буфер для разведения PKH поставляется как набор из пяти стерильных контейнеров по 10 мл 1× дилюента в каждом. Рекомендуется хранить в холодильнике и доводить до комнатной температуры непосредственно перед использованием.

BrdU (5-бромо-2’-дезоксиуридин) — синтетический аналог тимидина, который можно использовать для изучения синтеза ДНК de novo и клеточной пролиферации. BrdU встраивается в реплицирующуюся ДНК вместо природного тимидина во время S-фазы клеточного цикла. Полученную таким образом ДНК можно детектировать иммунохимически с помощью антител, специфичных к BrdU.

DiR — карбоцианиновый краситель, флуоресцирующий в ближней инфракрасной части спектра, для мечения клеточных мембран in vivo и in vitro. DiR диффундирует латерально в плазматической мембране, постепенно окрашивая всю клетку, что позволяет использовать его в качестве антероградного и ретроградного трейсера нейронов. В интактной ткани краситель не переходит из меченых клеток в немеченые, однако такой перенос может происходить при разрушении мембран клеток, например, после секционирования образца. Краситель слабо флуоресцирует до включения в мембраны и в водной среде. DiR может быть использован совместно с другими трейсерами в многоцветных окрашиваниях, например, с DiI и DiO и для NIR-имиджинга.