Биореактивы

Флуоресцентный краситель метокси-хлор-флуоресцеин (иначе JOE), содержащий азидную группу. Чистый 5-изомер. Предназначен для модификации с помощью click-реакций. Эмиссия в желтой области спектра. Кристаллическое вещество от оранжевого до коричневого цвета. Хорошо растворим в диметилсульфоксиде, диметилформамиде и других полярных растворителях.

Антитела кролика к иммуноглобулинам курицы идеально подходят для использования в методах иммуноферментного анализа. В ИФА имеют следующую специфичность: Иммуноглобулины курицы 100 % Иммуноглобулины человека <5 %.

ДНКаза Е — термостойкая эндонуклеаза, разрушающая ДНК до одноцепочечных олигонуклеотидов. Ферментативная активность проявляется в присутствии катионов кальция и магния, а ее оптимум достигается при слабокислом рН и повышенной температуре.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: CTAG C↓TAG GATC GAT↑C Источник: Sporosarcina species M Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, способное гидролизовать 1 мкг λ-ДНК в 50 мкл реакционной смеси в SE-буфере Y при 55 С за 1 час. Активность при 37°С – 75% от исходной Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер Y Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 25-50 50-75 25-50 50-75 100 80 Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 7.6), 300 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 500 мкг/мл BSA, 0,01% Tритон Х-100, 7 мМ 2-меркаптоэтанол, 50% глицерин; Хранить при -20°С Лигирование: После гидролиза 3-кратным избытком фермента 5% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 4 ед. фермента в течение 16 часов при 55°С. Чувствительность к метилированию: Блокируется при перекрывании CG-метилированием С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.

Fluo-4 AM — проникающий в живые клетки кальциевый индикатор. Краситель метаболизируется внутриклеточными эстеразами, после чего он способен связываться с Ca2+, что приводит к появлению ярко-зеленого флуоресцентного сигнала (λ возбуждения/испускания — 494/506 нм). Fluo-4 AM используется для детекции внутриклеточного Ca2+. Он прекрасно подходит для различных задач флуорометрии и имиджинга, таких как микроскопия, проточная цитометрия, спектрофлуориметрия и флуорометрический высокопроизводительный скрининг на микропланшетах [1]. Fluo-4 AM похож по структуре и спектральным свойствам на широко используемый Ca2+-индикатор Fluo-3, но обладает рядом преимуществ перед ним, таких как более яркая флуоресценция, высокая скорость проникновения в клетку и Kd для Ca2+ около 345 нМ. Благодаря более высокой интенсивности флуоресценции, Fluo-4 AM можно использовать при более низких внутриклеточных концентрациях, что делает его использование менее токсичным для живых клеток. Поскольку Fluo-4 AM не связывается ковалентно с клеточными компонентами, он может активно выводиться из клетки органическими переносчиками анионов, поэтому визуализация клеток in vivo с помощью Fluo-4 AM обычно выполняется в течение одного или двух часов после добавления красителя. При этом, краситель может быть повторно загружен в клетки, если это необходимо. Fluo-4 AM также можно фиксировать in situ с помощью EDC/EDAC для последующих окрашиваний методами иммунофлуоресценции. Fluo-4 AM имеет низкую растворимость в воде. Перед добавления к клеткам рекомендуется приготовить стоковый 1 мМ раствор красителя в ДМСО для мечения. Используйте конечную концентрацию 1–5 мкМ и инкубацию при 37°C в течение 15–60 мин в качестве отправной точки вашего протокола.

Антитела овцы к иммуноглобулину IgM человека идеально подходят для использования в методах иммуноферментного анализа. В ИФА имеют следующую специфичность: IgM человека 100 % IgA человека <5% IgG человека <5% Молекула IgM обычно существует в пентамерной форме (молекулярная масса около 900 кДа), изредка - в виде других полимерных комплексов и весьма редко - как мономер. IgM представляют собой классические поверхностные иммуноглобулины, связанные с клеточной мембраной зрелых B-лимфоцитов. Они имеют четыре консервативных домена. Пентамерные молекулы IgM удерживаются с помощью J-цепей. IgM имеет высокое сродство к комплементу.

Условия хранения: Хранить при -20°C Последовательность: GTAAAACGACGGCCAGT Примечание: Поставляются в сухом виде.

Описание: Представляет собой плазмиду pUC19 гидролизованную ферментом Kzo9 I с образованием 15 фрагментов пригодных для использования в качестве стандарта молекулярных весов в агарозном и полиакриламидном гель-электрофорезе. Длины фрагментов Длина фрагмента, п.н. Длина фрагмента, п.н. Длина фрагмента, п.н. Длина фрагмента, п.н. 955 141 46 12 585 105 36 11 341 78 18 8 258 75 17 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.8); 1 mM EDTA; 50 mM NaCl. Хранить при – 20°С. Примечание: Рекомендуется наносить 1 мкг ДНК маркера на 1 дорожку. Перед использованием в ДНК маркер добавить1/10 объема SE-буфера для нанесения с красителем. Маркер с красителем может храниться при 4-8°С в течение 6 месяцев.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: GCGATCGC GCGAT↑CGC CGCTAGCG CGC↓TAGCG Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген AsiSI из Arthrobacter species S Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК Аденовируса-2 за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК Аденовируса-2 Оптимальный буфер: SE-буфер B Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 100 75 10 25 25 Условия хранения: 20 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: Не блокируется dam-метилированием при перекрывании (GmATC): GCGATCGC Блокируется CG метилированием. С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B. Примечание: Фермент обладает звездчатой активностью.

Окрашенная реакционная смесь 5X ScreenMix-HS предназначена для проведения ПЦР анализа большого количества образцов. В состав 5X ScreenMix-HS входят все необходимые компоненты ПЦР: высокопроцессивная Taq ДНК полимераза со специфическими моноклональными антителами, смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов, Mg2+, ПЦР буфер, красители. Для постановки реакции ПЦР в смесь требуется добавить только праймеры, матрицу ДНК и воду.

Источник: Из штамма E.coli, несущего рекомбинантный ген Описание: Экзонуклеаза III E.coli катализирует ступенчатое удаление мононуклеотидов с 3’-гидроксильного конца каждой из цепей двуцепочечной ДНК (работает в направлении 3’—>5’), если у этой ДНК «тупые» или 5’-выступающие концы. Экзонуклеаза III способна использовать в качестве субстрата и ДНК с 3’-выступающими концами, но только в случае, если длина такого выступающего конца менее 4-х нуклеотидов. Фермент также обладает эндонуклеазной активностью по отношению к апуринизированной ДНК, гидролизует РНК в РНК-ДНК-гибридах и обладает 3′-фосфатазной активностью. Определение единицы активности: За одну единицу активности принимали количество фермента, необходимого для образования 1 нмоля кислоторастворимых продуктов гидролиза за 30 мин при 37°С. Оптимальный буфер: SE-буфер Экзонуклеаза III Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.5 mM EDTA; 1 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.

Сайт узнавания и позиция гидролиза: GAGCGG GAG↑CGG CTCGCC CTC↓GCC Источник: Acinetobacter calcoaceticus BS Определение единицы активности: За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси. Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда Оптимальный буфер: SE-буфер Y Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной: B G O W Y ROSE 75 75 25 25 100 100 Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С. Лигирование: После гидролиза 5-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 50% могут быть повторно расщеплены. Неспецифический гидролиз: Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Чувствительность к метилированию: не проверялось С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.