Тетразиновое производное красителя Cyanine3B для конъюгации с напряженными олефинами и концевыми алкенами посредством реакции Дильса-Альдера с обращенными электронными требованиями (Inverse electron demand Diels-Alder ligation, IEDDA). IEDDA — самая быстрая реакция циклоприсоединения среди известных клик-реакций. Метилтетразины обладают оптимальной физиологической стабильностью pH, сохраняя при этом чрезвычайно высокую реакционную способность по отношению к циклооктенам. Тетразины также реагируют с некоторыми напряженными циклоалкинами.
Cyanine3B — цианиновый краситель с желтой эмиссией, являющийся улучшенной версией флуорофора Cyanine3, обладающий значительно более высокими квантовым выходом флуоресценции и фотостабильностью.
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GCGC GCG↑C
CGCG C↓GCG
Источник: Bacillus stearothermophilus HH
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
75 50 25 50 100 100
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С
Лигирование:
После гидролиза 50-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 100 ед фермента в течение 16 часов при 50°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием
5`- G(5mC)GC – 3`/3`- CG(5mC)G – 5` и
5`- G(5mC)GC – 3`/3`- CGCG – 5`.
Не блокируется при метилировании
5`- GCG(5mC) – 3`/3`- (5mC)GCG – 5` и
5`- GCG(5mC) – 3`/3`- CGCG – 5`.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y, BSA
Примечание:
Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл.
BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
QuantumDNA-Set состоит из 3-х наборов: QuantumDNA-91, -156 и -211.
Наборы QuantumDNA предназначены для количественной и качественной
оценки геномной ДНК человека. С помощью QuantumDNA устанавливают
концентрацию пригодных для ПЦР фрагментов. Это эффективная концентрация ДНК, которая часто расходится с абсолютной.
Оценка с помощью QuantumDNA позволяет:
− отбраковать образцы с низкой эффективной концентрацией ДНК или
с ингибиторами ПЦР. Это сэкономит время и реагенты целевой ПЦР,
снизит риск ложноотрицательных результатов анализа;
− рассчитать оптимальное количество ДНК для целевой реакции. Это
повысит воспроизводимость и надежность результатов целевой ПЦР.
Реагенты серии GenJect™ (GenJector-U, GenJect-39 и GenJect-40) являются оригинальной разработкой “Молекта” и эффективны для трансфекции плазмидной ДНК (включая CRISPR плазмиды), а также линейных коротких и длинноцепочечных молекул ДНК и РНК (siRNA, mRNA) в присутствии сыворотки крови в широкий спектр эукариотических клеточных линий, включая суспензионные и адгезионные HeLa, HEK293T, CHO-K1, SH-SY5Y, Neuro2A и др., стволовые клетки и первичные клеточные культуры
Наборы QuantumDNA предназначены для количественной и качественной
оценки геномной ДНК человека. С помощью QuantumDNA устанавливают
концентрацию пригодных для ПЦР фрагментов. Это эффективная концентрация ДНК, которая часто расходится с абсолютной.
Оценка с помощью QuantumDNA позволяет:
− отбраковать образцы с низкой эффективной концентрацией ДНК или
с ингибиторами ПЦР. Это сэкономит время и реагенты целевой ПЦР,
снизит риск ложноотрицательных результатов анализа;
− рассчитать оптимальное количество ДНК для целевой реакции. Это
повысит воспроизводимость и надежность результатов целевой ПЦР.
Антитела кролика к коллагену I,III человека, аффинно-очищенные, идеально подходят для использования в методах вестерн-блота и иммуногистохимии (парафиновые срезы тканей), так как они связываются как с нативным, так и с термически денатурированным коллагеном I типа. В ИФА имеют следующую специфичность:
Коллаген человека I типа 100 %
Коллаген человека III типа 100 %
Другие коллагены человека (IV, V) <10%.
Сайт узнавания: GG(m6A)TG
Источник: из штамма E.coli, содержащего клонированный ген ДНК метилтрансферазы BstF5 I из Bacillus stearothermophilus F5.
Описание:
Модифицирует аденин (mA) в последовательности узнавания 5`-GGATG- 3`.
Определение единицы активности:
За одну единицу активности принимают количество фермента, необходимое для защиты 1 мкг λ DNA в течение 1 ч при 60ºC в 20 мкл реакционной смеси от гидролиза эндонуклеазой рестрикции BstF5 I.
Реакционный буфер: SE-буфер K + SAM
Условия хранения: 10 mМ Tris-HCl (pH 7.5), 50 mМ NaCl и 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Примечание:
Для достижения 100% активности SAM следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 80 μM.
Коллаген быка I типа (B C11-ACL) выделен из сухожилий быка, полученных от здоровых животных. В препарате B C11-ACL содержится около 90% коллагена I типа и незначительная примесь коллагена III типа. B C11-ACL - это легкорастворимый стерильный ателоколлаген. B C11-АCL идеально подходит для формирования плотных прозрачных гидрогелей, пригодных для 3D культивирования. Данный продукт удобно использовать в различных областях регенеративной медицины, B C11-АCL совместим с различными органическими и неорганическими биоматериалами.
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GAATTC G↑AATTC
CTTAAG CTTAA↓G
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген EcoR I из Escherichia coli
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер EcoRI
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
50 75 75 75 50 50
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 40-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер EcoRI, BSA (кроме E057T и E058T).
Для фасовок Turbo (E057T и E058T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечание:
При большом избытке фермента, при использовании неоптимального буфера возможно появление звездчатой активности.
Длительная инкубация c BSA не рекомендуется из-за появления звездчатой активности.
Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл.
BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
Иммуноглобулины IgG мыши (M Igg) выделены из сыворотки крови животного методом сульфатного осаждения, с последующей очисткой методом ион-обменной хроматографии. В препарате M Igg содержится около 95% иммуноглобулинов IgG мыши и незначительная примесь иммуноглобулинов IgA и иммуноглобулинов IgM (не более 2%).