Обратная транскриптаза MMLV, на 500-1000 реакций

T3 Promoter — стандартный праймер комплементарен промотору РНК-полимеразы T3 бактериофага соответственно. Старт транскрипции начинается с подчеркнутого G. Нуклеотидная последовательность: T3 Promoter: 5’-GCA ATT AAC CCT CAC TAA AGG-3’

Магнитный сорбент ExtraGen® представляет собой водную суспензию твердофазных магнитных частиц на основе оксида железа и оксида кремния. Он предназначен для выделения нуклеиновых кислот из клинических и биологических образцов. Суспензия магнитного сорбента обладает «промежуточной» седиментационной устойчивостью, что особенно важно при использовании материала в автоматических системах выделения ДНК. Частицы ExtraGen® устойчивы к нагреву, сильным окислителям и интенсивным механическим воздей­ствиям (центрифугирование, дисперги­рование и т.п.). Использование фирменного буферного раствора позволяет хранить частицы при комнатной температуре в течение года без ухудшения их сорбционных свойств. Как показали испытания, сорбент ExtraGen® проявляет высокую эффективность при выделении нуклеиновых кислот как в ручном режиме, так и с использованием автоматических станций.

Genta-RT kit представляет собой набор реагентов для проведения синтеза первой цепи кДНК на матрице РНК. Набор включает в себя: in silico модифицированный гомолог обратной транскриптазы вируса лейкемии мышей Молони (MMLV) – Genta REV M ревертазу; Олиго(dT)18 праймер; воду для ПЦР и 2 вида 5-кратного реакционного буфера (включающего в себя дНТФ и ДТТ): 5х ОТ-буфер R – наличие Random-праймеров в реакционном буфере позволяет проводить синтез тотальной кДНК. 5х ОТ-буфер – требуется добавление специфических праймеров для синтеза целевого фрагмента кДНК; или добавление Олиго(dT)18 праймера для полиаденилированной РНК.

Протеиназа «ALZYME K» предназначена для очистки ферментативных смесей и клеточных лизатов от нежелательных белков при выделении РНК/ДНК из микроорганизмов, клеточных культур, растений и других образцов, для инактивации нуклеаз и повышения эффективности лизиса тканей при выделении нуклеиновых кислот.

Данный набор предназначен для измерения концентрации двухцепочечной ДНК в широком диапазоне на флуориметре (подходит любая версия флуориметра). Набор включает в себя 200× концентрат флуоресцентного красителя QuDye dsDNA BR, буфер для приготовления рабочего раствора красителя и стандарты концентрации ДНК (0 и 100 нг/мкл). Краситель QuDye dsDNA BR обладает селективностью по отношению к двухцепочечной ДНК, поэтому на результаты измерения не влияют примеси РНК, нуклеотидов и белков. Другие примеси в незначительном количестве, такие как соли, детергенты и растворители, оказывают несущественное влияние на результаты измерений. Данный набор позволяет точно измерять концентрацию дцДНК в диапазоне от 100 пг/мкл до 1000 нг/мкл для исходного образца (диапазон количества ДНК для измерения на флуориметре: 2–1000 нг ДНК в 200 мкл образца для измерения). Основной компонент набора — флуоресцентный краситель QuDye dsDNA BR, селективно связывающий ДНК и проявляющий выраженную флуоресценцию в составе комплекса с молекулой ДНК. Использование данного набора является удобным способом квантификации дцДНК в широком диапазоне концентраций, он не требует большого объема исходного образца (1–20 мкл), все измерения проводятся при комнатной температуре и занимают, в среднем, 15-20 минут (в зависимости от количества образцов); флуоресценция образцов стабильна в течение 3 часов. Для проведения измерения необходимо приготовить рабочий раствор красителя, развести в нем в отдельных пробирках стандарты концентрации ДНК и экспериментальные образцы и провести измерения интенсивности флуоресценции на флуориметре. Для удобства мы предлагаем фасовки набора, включающие совместимые с флуориметром тонкостенные пробирки. Кроме этого, данный набор можно использовать в сочетании с набором QuDye Protein Quantification Kit для определения примеси белка в образце ДНК. Для количественного анализа образцов с меньшей концентрацией дцДНК воспользуйтесь набором QuDye dsDNA HS Assay Kit с диапазоном измеряемых концентраций 10 пг/мкл—100 нг/мкл для исходного образца.

5X Genta qPCR мастер-микс – готовая к использованию смесь для проведения качественной или количественной ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени. Мастер-микс обеспечивает надежную работу ПЦР в широком спектре приложений. Мастер-микс позволяет проводить ПЦР-РВ в мультиплексном формате. 5X Genta qPCR мастер-микс содержит все необходимые для проведения ПЦР компоненты, включая полимеразу Genta TaqF, дНТФ, Mg2+, краситель SYBR Green I и реакционный буфер. Для постановки реакции ПЦР в реакционную смесь необходимо добавить только олигонуклеотиды, матрицу и воду. Химически инактивированная ДНК-полимераза Genta TaqF позволяет проводить подготовительные работы при комнатной температуре и обеспечивает высокоспецифичную амплификацию благодаря возможности проведения «горячего» старта. Ингибирование активности фермента снимается при его прогревании при 95°C в течение 15 минут.

Наборы Mint kit-2 предназначены для приготовления двухцепочечной амплифицированной кДНК, обогащенной полноразмерными последовательностями, на основе тотальной или полиА+ РНК. Mint kit-2 содержит дополнительные адаптеры, позволяющие приготовить кДНК, оптимальную для последующего секвенирования на платформах Roche/454, ABI/SOLiD или Illumina/Solexa и для направленного клонирования библиотек кДНК.

Стандартный праймер комплементарен промотору цитомегаловируса человека (CMV). Нуклеотидная последовательность: CMV Forward: 5’-CGC AAA TGG GCG GTA GGC GTG-3’

Genta UDG гликозилаза термолабильная - термочувствительный фермент, катализирующий высвобождение урацила из урацил-содержащих одно- или двуцепочечных ДНК. Применяется для предотвращения появления ложноположительных результатов, вызванных контаминацией ампликонами. Фермент не проявляет активности в отношении РНК и олигомеров и полностью инкативируется в ходе первого цикла ПЦР при нагревании выше 70°С, не препятствуя амплификации продуктов ПЦР.

Ингибитор РНКаз RiboCare предназначен для защиты РНК от деградации РНКазами. Ингибитор РНКаз RiboCare формирует комплексы с РНКазами, тем самым эффективно предотвращая деградацию РНК. Ингибитор РНКаз RiboCare представляет собой рекомбинантный белок, выделенный из штамма-продуцента E.coli. Защита РНК от деградации РНКазами в реакциях: – синтез кДНК, – синтез кДНК и ПЦР в одной пробирке, – in vitro транскрипция, – при обработке РНК ДНКазами

Осаждающий буфер «ALPREP PRC» – это реагент, предназначенный для эффективного связывания нуклеиновых кислот со связывающим материалом-носителем. Принцип метода основан на связывании нуклеиновых кислот со связывающим материалом-носителем за счёт присутствия в составе буфера хаотропных веществ и детергентов. Буфер «ALPREP PRC» поставляется в виде концентрата. Перед первым использованием добавьте изопропанол (100%), как указано на бутылке.

Смесь дезоксинуклеотидов dNTP представляет собой эквимолярный раствор высокоочищенных 2’-дезоксинуклеозид-5’-трифосфатов (dATP, dTTP, dGTP, dCTP). Смесь dNTP предназначена для использования с ДНК-полимеразами в различных приложениях, в том числе в ПЦР, обратной транскрипции и других реакциях синтеза ДНК.

Олигонуклеотиды – короткие фрагменты нуклеиновых кислот, которые широко используются в различных областях ДНК-диагностики (медицинская диагностика, криминалистический анализ, ветеринария, контроль качества продуктов питания и др.). В последнее время широкое распространение олигонуклеотиды получили в качестве лекарственных средств против различных генетических и других заболеваний. Компания ГенТерра производит ДНК- и РНК-олигонуклеотидов в масштабах от нескольких миллиграмм до граммовых количеств, в том числе и модифицированные олигонулеоитды, флуоресцентно-меченые олигонуклеотиды и зонды для ПЦР в реальном времени.

Обратная транскриптаза (ревертаза) Magnus предназначена для синтеза первой цепи комплементарной ДНК с одноцепочечной матрицы РНК. Обратная транскриптаза Magnus — модифицированная ревертаза MMLV. Особенностью Magnus является повышенная термостойкость и отсутствие активности РНКазы H, что позволяет: – Увеличить температуру обратной транскрипции для повышения специфичности реакции. – Проводить синтез кДНК на GC-богатых областях и на матрицах со сложной вторичной структурой. – Получать кДНК длиной до 12 000 п.о. Область применения: • Синтез первой цепи кДНК с дальнейшей возможностью амплификации, клонирования и экспрессии. • Синтез первой цепи кДНК с последующим анализом с помощью ПЦР в реальном времени (ОТ-ПЦР-РВ). Частные случаи применения: синтез первой цепи кДНК-копии РНКвирусов для последующей качественной или количественной оценки.

ДНКаза Е — термостойкая эндонуклеаза, разрушающая ДНК до одноцепочечных олигонуклеотидов. Ферментативная активность проявляется в присутствии катионов кальция и магния, а ее оптимум достигается при слабокислом рН и повышенной температуре.

6-FAM-11-2’-дезоксиуридин-5’-трифосфат, трилитиевая соль, является широко используемым соединением для нерадиоактивного мечения ДНК. FAM — флуоресцеин, популярный краситель с эмиссией в зеленой области спектра, с максимумом флуоресценции при 513 нм. Данное производное представляет собой чистый 6-изомер FAM. 6-FAM-11-dUTP — модифицированный трифосфат, способный встраиваться в ДНК вместо dTTP различными ферментами, в том числе фрагментом Кленова, Taq-полизмеразой, ДНК-полимеразой I, Phi 29 полимеразой, обратной транскриптазой или терминальной трансферазой. В отличие от трифосфатов с красителем, напрямую связанным с аминоаллил-dUTP, этот трифосфат содержит линкер из 11 атомов между флуорофором и азотистым основанием. Такая длина линкера предотвращает возможное статическое тушение FAM-метки, а также повышает эффективность инкорпорирования нуклеотида во время синтеза цепи ДНК. FAM-11-dUTP можно использовать для получения меченого продукта во время ПЦР и синтеза кДНК, получения меченых ДНК-зондов методом случайных праймеров или Nick-трансляции. Полученные флуоресцентно-меченные ДНК-зонды могут быть использованы для идентификации исследуемых последовательностей с помощью Саузерн-блота, Нозерн-блота, гибридизации in situ или при анализе с использованием микрочипов.