Каталог
Вернуться к результатам поиска
Sma I
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
CCCGGG CCC↑GGG
GGGCCC GGG↓CCC
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Sma I из Serratia marcescens
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (HindIII-digest) за 1 час при 25°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда (HindIII-digest)
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
100 50
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 μg/ml BSA; 1 mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 20-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК сшиваются высокоактивной T4 ДНК-лигазой в присутствии 10% ПЭГ и могут быть повторно расщеплены. В присутствии 10% ПЭГ сшивка более эффективна.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 25°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
Для фасовок Turbo (E177T и E178T) прикладывается буфер 10x SE-Буфер Y.
Turbo Sma I можно использовать как для быстрого гидролиза ДНК (в течение 15 мин), так и в стандартной реакции гидролиза в течение 1 ч.
Применение Turbo эндонуклеаз рестрикции:
– быстрый гидролиз (анализ) ДНК
– быстрое приготовление векторов для клонирования
– гидролиз ДНК двумя разными ферментами
Свойства Turbo фермента: С помощью 1 мкл эндонуклеазы рестрикции Turbo Sma I можно расщепить до 1 мкг двуцепочечной ДНКв 1x SE-Буфере Y в течение 15 мин (см. протокол ниже).
Препарат ДНК, используемый в реакции быстрого гидролиза Turbo ферментом, должен быть высокой степени очистки.
Данный Turbo фермент можно применять и в стандартной реакции гидролиза ДНК (в течение 1-16 ч).
Стандартный протокол Turbo реакции:
На 20 мкл реакционной смеси:
Y (x10) – 2 мкл
ДНК – 0,2-1 мкг
Дист. вода – до 20 мкл
+ 1мкл препарата Turbo Sma I эндонуклеазы рестрикции.
Инкубировать при 25°C в течение 15 мин.
CCCGGG CCC↑GGG
GGGCCC GGG↓CCC
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Sma I из Serratia marcescens
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (HindIII-digest) за 1 час при 25°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда (HindIII-digest)
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
100 50
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 200 μg/ml BSA; 1 mM DTT; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 20-кратным избытком фермента 90% фрагментов ДНК сшиваются высокоактивной T4 ДНК-лигазой в присутствии 10% ПЭГ и могут быть повторно расщеплены. В присутствии 10% ПЭГ сшивка более эффективна.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 25°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
Для фасовок Turbo (E177T и E178T) прикладывается буфер 10x SE-Буфер Y.
Turbo Sma I можно использовать как для быстрого гидролиза ДНК (в течение 15 мин), так и в стандартной реакции гидролиза в течение 1 ч.
Применение Turbo эндонуклеаз рестрикции:
– быстрый гидролиз (анализ) ДНК
– быстрое приготовление векторов для клонирования
– гидролиз ДНК двумя разными ферментами
Свойства Turbo фермента: С помощью 1 мкл эндонуклеазы рестрикции Turbo Sma I можно расщепить до 1 мкг двуцепочечной ДНКв 1x SE-Буфере Y в течение 15 мин (см. протокол ниже).
Препарат ДНК, используемый в реакции быстрого гидролиза Turbo ферментом, должен быть высокой степени очистки.
Данный Turbo фермент можно применять и в стандартной реакции гидролиза ДНК (в течение 1-16 ч).
Стандартный протокол Turbo реакции:
На 20 мкл реакционной смеси:
Y (x10) – 2 мкл
ДНК – 0,2-1 мкг
Дист. вода – до 20 мкл
+ 1мкл препарата Turbo Sma I эндонуклеазы рестрикции.
Инкубировать при 25°C в течение 15 мин.
Acc65 I
от
2 750 ₽
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GGTACC G↑GTACC
CCATGG CCATG↓G
Источник: Acinetobacter calcoaceticus 65
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда(dcm-) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда (dcm-)
Оптимальный буфер: SE-буфер W
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
10 25 75 100 10 100
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 200ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 10-кратным избытком фермента около 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется при перекрывании dcm-метилированием (СmCWGG): GGTACCWGG.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер W.
Для фасовок Turbo (E003T и E004T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечание: Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
SibEnzyme
Новосибирск
Fau I
от
4 500 ₽
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
CCCGC(N)4 CCCGC(N)4↑
GGGCG(N)6 GGGCG(N)6↓
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Fau I из Flavobacterium aquatili
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 55°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер B
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
100 25 50 50
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 2-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 95% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 2 ед фермента в течение 16 часов при 55°С
Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B.
SibEnzyme
Новосибирск
Bmt I
от
5 500 ₽
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GCTAGC GCTAG↑C
CGATCG C↓GATCG
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Bmt I из Bacillus megaterium S2
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (HindIII-digest) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда (Hind III-digest)
Оптимальный буфер: SE-буфер W
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
10 50 50 100 75 100
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер W.
Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
SibEnzyme
Новосибирск
Bmu I
от
5 750 ₽
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
ACTGGG(N)5 ACTGGG(N)5↑
TGACCC(N)4 TGACCC(N)4↓
Источник: Bacillus megaterium S87
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда (HindIII-digest) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда (HindIII-digest)
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
75 75 25 10 100 25
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 250 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 2-кратным избытком фермента около 75% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 95% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 0,5 ед фермента в течение 4 часов при 37°С.Длительная инкубация не рекомендуется.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y
Примечание:
Фермент активен в присутствии ЭДТА.
Длительная инкубация не рекомендуется.
SibEnzyme
Новосибирск
Bgl I
от
1 725 ₽
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GCCNNNNNGGC GCCNNNN↑NGGC
CGGNNNNNCCG CGGN↓NNNNCCG
Источник: Bacillus globigii
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер 2W
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
50 50 75 25 100
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°C.
Лигирование:
После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°C. Большой избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности
Чувствительность к метилированию: Не блокируется dсm-метилированием при перекрывании (CmCWGG): GCCWGGNNGGCС ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер 2W.
Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
Примечание:
Избыток фермента приводит к появлению звездчатой активности.
SibEnzyme
Новосибирск
AccB7 I
от
1 250 ₽
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
CCANNNNNTGG CCANNNN↑NTGG
GGTNNNNNACC GGTN↓NNNNACC
Источник: Acinetobacter calcoaceticus B7
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда(dcm-) за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда (dcm-)
Оптимальный буфер: SE-буфер G
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
10 100 25 50 50 100
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 50 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 200ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется при перекрывании dcm- метилированием (CmCWGG): CCANNNCCTGG или CCAGGNNNTGG.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер G
Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
SibEnzyme
Новосибирск
PalA I
от
1 725 ₽
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GGCGCGCC GG↑CGCGCC
CCGCGCGG CCGCGC↓GG
Источник: Из штамма E. coli, несущего клонированный ген PalA I из Pseudomanas alcaligenes BS17Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
25 10 -10 -10 100 40
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 95% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг λ-ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С
Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
SibEnzyme
Новосибирск
Sph I
от
4 400 ₽
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GCATGC GCATG↑C
CGTACG C↓GTACG
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Sph I из Streptomyces phaeochromogenes
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер G
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
25 100 75 75 50 100
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 μg/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 5 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер G, BSA (кроме E129T и E130T).
Для фасовок Turbo (E129T и E130T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечание:
Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл.
BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
SibEnzyme
Новосибирск
Abs I
от
7 500 ₽
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
CCTCGAGG CC↑TCGAGG
GGAGCTCC GGAGCT↓CC
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген Abs Iиз Arthrobacter species 7М06.
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, способное гидролизовать 1 мкг ДНК pUC19SE/DriI в 50 мкл реакционной смеси в SE-буфере AbsI при 37°С за 1 час
Субстрат для определения активности:
pUC19SE/DriI
Оптимальный буфер: SE-буфер AbsI
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
10-25 10-25 0-10 25-50 10-25 25
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 50 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 200 мкг/мл BSA, 0.05% Triton X-100, 7 mM 2-меркаптоэтанол, 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер AbsI
Примечание: Длительная инкубация может привести к появлению звездчатой активности.
SibEnzyme
Новосибирск
Bsu I
от
5 750 ₽
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GTATCC(N)6 GTATCC(N)6↑
CATAGG(N)5 CATAGG(N)5↓
Источник: Bacillus sphaericus
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
75 50 10 25 100 10
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 мкг/мл BSA, 0.05% Triton X-100, 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 10% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 4 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
SibEnzyme
Новосибирск
EcoR I
от
1 650 ₽
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GAATTC G↑AATTC
CTTAAG CTTAA↓G
Источник: Из штамма E.coli несущего клонированный ген EcoR I из Escherichia coli
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер EcoRI
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
50 75 75 75 50 50
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 200 μg/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 40-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер EcoRI, BSA (кроме E057T и E058T).
Для фасовок Turbo (E057T и E058T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечание:
При большом избытке фермента, при использовании неоптимального буфера возможно появление звездчатой активности.
Длительная инкубация c BSA не рекомендуется из-за появления звездчатой активности.
Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл.
BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
SibEnzyme
Новосибирск
MroX I
от
1 150 ₽
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GAANNNNTTC GAANN↑NNTTC
CTTNNNNAAG CTTNN↓NNAAG
Источник: Micrococcus roseus X
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер W
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
50 50 50 100 25 100
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM NaCl; 0,1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 50% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер W.
SibEnzyme
Новосибирск
AspLE I
от
1 100 ₽
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
GCGC GCG↑C
CGCG C↓GCG
Источник: Arthrobacter species LE3860
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер O
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
10 75 100 50 25 100
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 10-кратным избытком фермента более 90% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С. Фермент чувствителен к CpG метилированию
Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием
5`- G(5mC)GC – 3`/3`- CG(5mC)G – 5`
Не блокируется при метилировании
5`- GCG(5mC) – 3`/3`- (5mC)GCG – 5` и
5`- GCG(5mC) – 3`/3`- CGCG – 5`.
Гидролизует полуметилированный по внутреннему цитозину сайт: 5`-G(5mC)GC-3`/3`-СGCG-5`
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер O.
Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
SibEnzyme
Новосибирск
Pce I
от
3 000 ₽
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
AGGCCT AGG↑CCT
TCCGGA TCC↓GGA
Источник: Planococcus citreus
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 50°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
75 75 50 25 100 100
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 100 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 20-кратным избытком фермента 70% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 50°С
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
Для фасовок Turbo (E105T и E106T) прикладывается только буфер ROSE.
Примечание: При температуре 37°С активность 50% от максимальной.
SibEnzyme
Новосибирск
BspAC I
от
5 500 ₽
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
CCGC C↑CGC
GGCG GGC↓G
Источник: Bacillus species AC
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер O
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
10 25 100 75 10 100
Условия хранения: 10 mM KH2PO4(pH 7.2); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA; 50% глицерин. Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 50% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 10 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: Блокируется CG метилированием.
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер O, BSA
Примечание:
Для достижения 100% активности BSA следует добавлять в реакционную смесь до концентрации 100 мкг/мл
BSA при длительной инкубации использовать не рекомендуется.
SibEnzyme
Новосибирск
Bse1 I
от
1 725 ₽
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
ACTGGN ACTGGN↑
TGACCN TGAC↓CN
Источник: Bacillus stearothermophilus 1
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 65°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер Y
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
75 75 25 10 100 100
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 100 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 100 ug/ml BSA; 50% глицерин; Хранить при -20°C.
Лигирование:
После гидролиза 20-кратным избытком фермента более 95% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 40 ед фермента в течение 16 часов при 65°C.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер Y.
SibEnzyme
Новосибирск
Psi I
от
3 850 ₽
Сайт узнавания и позиция гидролиза:
TTATAA TTA↑TAA
AATATT AAT↓ATT
Источник: Pseudomonas species SE-G49
Определение единицы активности:
За единицу активности принимается количество фермента, необходимое для гидролиза 1 мкг ДНК фага лямбда за 1 час при 37°С в 50 мкл реакционной смеси.
Субстрат для определения активности: ДНК фага лямбда
Оптимальный буфер: SE-буфер B
Активность фермента в различных буферах в процентах от максимальной:
B G O W Y ROSE
100 25 10 25 75 40
Условия хранения: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5); 200 mM KCl; 0.1 mM EDTA; 200 ug/ml BSA; 7 mM 2-меркаптоэтанол; 50% глицерин; Хранить при -20°С.
Лигирование:
После гидролиза 5-кратным избытком фермента около 50% фрагментов ДНК сшиваются ДНК-лигазой и 95% из них могут быть повторно расщеплены.
Неспецифический гидролиз:
Картина специфического гидролиза не изменяется при обработке 1 мкг ДНК 20 ед фермента в течение 16 часов при 37°С.
Чувствительность к метилированию: не проверялось
С ферментом поставляется: 10 Х SE-буфер B.
Для фасовок Turbo прикладывается 10 X SE-буфер ROSE.
SibEnzyme
Новосибирск